產(chǎn)品及特點(diǎn):
熒光定量PCR是在PCR體系中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,使每個(gè)循環(huán)變得“可見(jiàn)”。本產(chǎn)品就是以探針?lè)晒舛?RT-PCR 技術(shù)為基礎(chǔ)開(kāi)發(fā)的專(zhuān)門(mén)檢測(cè)探針?lè)晒舛縋CR試劑盒的試劑盒。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
鞭蟲(chóng)通用探針?lè)≒CR熒光定量試劑盒 | Trichuris spp. | EY00P9465 |
運(yùn)輸及保存: 低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限為12個(gè)月。
自備試劑:樣品 RNA。
分類(lèi):熒光定量PCR試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)基因名稱(chēng)即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
染料法
探針?lè)ā?/font>
可進(jìn)行相對(duì),定量表達(dá)分析,定性分析,SNP檢測(cè)等
實(shí)驗(yàn)報(bào)告
電泳圖 ·標(biāo)準(zhǔn)曲線
溶解曲線 ·擴(kuò)增曲線
完整的實(shí)驗(yàn)過(guò)程、試劑、儀器及分析報(bào)告
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使用方法
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供無(wú)傳染性的 DNA 段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的制備
7. 如果有N個(gè)樣品,設(shè)置N+2個(gè)提取,多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽(yáng)性對(duì)照),一個(gè)是 NC(樣品制備陰性對(duì)照)??梢杂?0μL陽(yáng)性對(duì)照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購(gòu)本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費(fèi)贈(zèng)送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝,該釋放劑的裂解液可以直接作為RT-PCR模板,省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9. 如果做定量分析并且只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR 管,其中N+2個(gè)用于上步得到的 N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照(用水做模板),6個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+4 個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),1個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照(用第4號(hào)管的陽(yáng)性對(duì)照稀釋液做模板)。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
10. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照,并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加)
α-芋螺素GS分散橙 分析標(biāo)準(zhǔn)品Human HEPACAM2 (HEPACAM family member 2) ELISA KIT
α-芋螺素 IMI分散黃 3 分析標(biāo)準(zhǔn)品Human HGSNAT (Heparan-alpha-glucosaminide N-acetyltransferase) ELISA KIT
α-芋螺素 MI分散藍(lán)3 分析標(biāo)準(zhǔn)品Human HAVCR2 (Hepatitis A virus cellular receptor 2) ELISA KIT
α-芋螺素 SI分散藍(lán)7 分析標(biāo)準(zhǔn)品Human HNRNPM (Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein M) ELISA KIT
α-芋螺素SIA分散藍(lán)102 分析標(biāo)準(zhǔn)品Human JUN(Transcription factor AP-1) ELISA Kit
α-防御素-1,人分散藍(lán)106 分析標(biāo)準(zhǔn)品Human NHLH2 (Helix-loop-helix protein 2) ELISA KIT
α-內(nèi)啡肽分散紅1 分析標(biāo)準(zhǔn)品Human COQ3 (Ubiquinone biosynthesis O-methyltransferase, mitochondrial) ELISA KIT
α-溶蛋白(57-73)直接黑38 Dye content,≥45 %Human RBBP4 (Histone-binding protein RBBP4) ELISA KIT
α- Helical 促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子(12-41)3,4-二氯苯 98%Human HN1L (Hematological and neurological expressed 1-like protein) ELISA KIT
α- Helical 促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子(9-41)鄰苯二 AR,98%Human OTX1 (Homeobox protein OTX1) ELISA KIT
α-雜交因子(1-6)鄰苯二 99%,用于生化研究Human HCST (Hematopoietic cell signal transducer) ELISA KIT
α-促黑激素(11-13)鄰苯二(OPD) 99.5%Human HORMAD2 (HORMA domain-containing protein 2) ELISA KIT
[Acetyl-D-Lys11, DVal13]α-促黑激素(11-13)對(duì)苯二 AR,97%Human GMPR2 (GMP reductase 2) ELISA KIT
[Met5, Pro6, D-Phe7,D-Trp9, Phe10]α-促黑激素(5-13)間苯二 99%Human GADD45G (Growth arrest and DNA damage-inducible protein GADD45 gamma) ELISA KIT
[D-Val13] α-促黑激素,乙酰化(11-13)間苯二 99.5%Human PIGR(Polymeric Immunoglobulin Receptor/Membrane Secretory Component) ELISA Kit
鞭蟲(chóng)通用探針?lè)?/font>PCR熒光定量試劑盒鞘磷脂合酶1(SGMS1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)合成硅酸鎂吸附劑(250-125um) 質(zhì)量規(guī)格:>90.0%(N)
5-羥色受體4(HTR4)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)戊菊酯(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
5-羥色受體6(HTR6)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)呋喃他酮(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
乙酰復(fù)合-O-甲基轉(zhuǎn)移酶(ASMT)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)吡氟禾草靈標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.101mg/ml) 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(HPLC)
5-羥色受體7(HTR7)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)惡唑酮菌(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
載脂蛋白L2(APOL2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)氟蟲(chóng)脲(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)
載脂蛋白L3(APOL3)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)氟磺草(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)(T)
前列腺素還原酶1(PTGR1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)氟酰(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)