產(chǎn)品及特點(diǎn):
熒光定量PCR是在PCR體系中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,使每個(gè)循環(huán)變得“可見”。本產(chǎn)品就是以探針法熒光定量 RT-PCR 技術(shù)為基礎(chǔ)開發(fā)的專門檢測(cè)探針法熒光定量PCR試劑盒的試劑盒。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
旋毛蟲探針法PCR熒光定量試劑盒 | Trichinella spiralis | EY00P9446 |
運(yùn)輸及保存: 低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限為12個(gè)月。
自備試劑:樣品 RNA。
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)基因名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
染料法
探針法
可進(jìn)行相對(duì),定量表達(dá)分析,定性分析,SNP檢測(cè)等
實(shí)驗(yàn)報(bào)告
電泳圖 ·標(biāo)準(zhǔn)曲線
溶解曲線 ·擴(kuò)增曲線
完整的實(shí)驗(yàn)過程、試劑、儀器及分析報(bào)告
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使用方法
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供無(wú)傳染性的 DNA 段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的制備
7. 如果有N個(gè)樣品,設(shè)置N+2個(gè)提取,多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽(yáng)性對(duì)照),一個(gè)是 NC(樣品制備陰性對(duì)照)??梢杂?0μL陽(yáng)性對(duì)照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購(gòu)本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費(fèi)贈(zèng)送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝,該釋放劑的裂解液可以直接作為RT-PCR模板,省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9. 如果做定量分析并且只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR 管,其中N+2個(gè)用于上步得到的 N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照(用水做模板),6個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+4 個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),1個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照(用第4號(hào)管的陽(yáng)性對(duì)照稀釋液做模板)。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
10. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照,并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加)
[D-Ala2,Leu5,Arg6]腦啡肽正 Standard for GC,>99%(GC)Human PEMT (Phosphatidylethanolamine N-methyltransferase) ELISA KIT
[D-Ala2,Met5]- β-酪啡肽(1-5),牛乙酸正酯 AR,99.0% Human SLC51B (Organic solute transporter subunit beta) ELISA KIT
[D-Ala2,Met5]- β-酪啡肽(1-5)酰 , 牛甲醋酸酯 99%Human OAZ1 (Ornithine decarboxylase antizyme 1) ELISA KIT
[D-Ala4]-物質(zhì)P (4-11)乙二 99.4%Human GPNMB (Transmembrane glycoprotein NMB) ELISA KIT
[D-Arg0,Hyp2,3,D-Phe7]-緩激肽正 CP,98.5% Human OXGR1 (2-oxoglutarate receptor 1) ELISA KIT
[D-Arg0,Hyp3,D-Phe7]-緩激肽聚乙烯吡咯烷酮 平均分子量 8000, K16-18Human ELN(Elastin) ELISA Kit
[D-Arg0,Hyp3,D-Phe7,Leu8]-緩激肽三氯乙烯 CP,98.5%Human OSCAR (Osteoclast-associated immunoglobulin-like receptor) ELISA KIT
[D-Arg1,D-Phe5,DTrp7,9, Leu11]-物質(zhì)P1,2,3,4-四氫萘 CPHuman ODF3L1 (Outer dense fiber protein 3-like protein 1) ELISA KIT
[D-Arg1,D-Phe5,D-Trp7,11]-物質(zhì)P1,2,3,4-四氫萘 AR,97%Human OMD(Osteomodulin) ELISA Kit
[D-Arg1,D-Pro2,D-Phe7,DHis9]-物質(zhì)P1,2,3,4-四氫萘 Standard for GC, ≥99.5% (GC)Human OSBP2 (Oxysterol-binding protein 2) ELISA KIT
[D-Arg1,D-Pro2,DTrp7,9,Leu11]-物質(zhì)P1,2,3,4-四氫萘 >98.5%(GC)Human PNLIPRP1 (Inactive pancreatic lipase-related protein 1) ELISA KIT
[D-Arg1,D-Trp5,7,9,Leu11]-物質(zhì)P1,2,3,4-四氫萘 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5% (GC)Human PRRX1 (Paired mesoderm homeobox protein 1) ELISA KIT
[D-Arg1,D-Trp7,9,Leu11]-物質(zhì)P四 ACS,>99.5% (GC) Human PALLD (Palladin) ELISA KIT
[D-Arg2]皮啡肽(1-4), 酰四氯乙烯 CP,97%Human NPY4R (Neuropeptide Y receptor type 4) ELISA KIT
[D-Arg2,Lys4]-皮啡肽(1-4), 酰硫代乙酸 AR,90.0%Human SLC22A3 (Solute carrier family 22 member 3) ELISA KIT
旋毛蟲探針法PCR熒光定量試劑盒硬纖毛蛋白(STRC)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)乙苯標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,溶劑:二硫化碳) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
Surfeit 1蛋白(SURF1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)乙基汞標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,溶劑:甲苯) 質(zhì)量規(guī)格:>80%,Ind Grade
監(jiān)理蛋白(SVIL)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)異苯標(biāo)準(zhǔn)溶液(1mg/ml,基體:甲) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
偶對(duì)蛋白(SYMPK)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)硬脂酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)溶液(10.0ng/μL,基體:異辛烷) 質(zhì)量規(guī)格:>45%,BR
突觸蛋白Ⅰ(SYN1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,溶劑:甲) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
突觸回蛋白1(SYNGR1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)對(duì)硝基乙苯標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,溶劑:甲) 質(zhì)量規(guī)格:BR
突觸囊泡蛋白Ⅰ(SYT1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)類混合標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.10mg/ml,基體:甲) 質(zhì)量規(guī)格:>90%,進(jìn)分
硒磷酸合成酶1(SEPHS1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)酚標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,基體: 0.02mol/L NaOH溶液) 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BS