綜合微生物的培養(yǎng)方法,包括以下步驟:
(1)前期準(zhǔn)備:(A)滅菌處理;(B)制備Biolite水;(C)檢查設(shè)備和材料;
(2)按比例配制培養(yǎng)材料;
(3)導(dǎo)入曝氣,進(jìn)行繁殖培養(yǎng);
(4)取液觀察;(a)取液;(b)稀釋菌液;(c)平板培養(yǎng);
(5)分離并檢測(cè);
(6)取液儲(chǔ)存;通過(guò)該綜合微生物培養(yǎng)方法簡(jiǎn)單可操作性強(qiáng),培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以內(nèi),菌類穩(wěn)定不發(fā)生突變,且繁殖快速。
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規(guī)格參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
日本慢生根瘤菌規(guī)格 | Bradyrhizo | EY-J964246 |
資源名稱: 日本慢生根瘤菌
種屬: Bradyrhizobium│japonicum
分離基物: 褐土
提供形式: 凍干物
安全等級(jí): 1
模式菌株: no
應(yīng)用領(lǐng)域: 分類學(xué)上研究
培養(yǎng)基: 63
生長(zhǎng)條件: 28℃
存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
低溫存法:
①簡(jiǎn)單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過(guò)1~2個(gè)月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3~4個(gè)月;②液氮超低溫保存法,將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法保存。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無(wú)機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過(guò)0.5%),碳源豐富容易造成酸性的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營(yíng)養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營(yíng)養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐,常采用母瓶、子瓶?jī)杉?jí)培養(yǎng),有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長(zhǎng)。原則上各種營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過(guò)程,因菌種不同而異,一般可分為一級(jí)種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級(jí)種子,把一級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為二級(jí)發(fā)酵。如果將一級(jí)種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過(guò)培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級(jí)種子,將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理,使用三級(jí)種子的發(fā)酵,稱為四級(jí)發(fā)酵。
Human angiotension I receptor Antibody,ANGⅠR antibody ELISA試劑盒Arbutin純度:≥98%
Human ankyrin B,AnkB ELISA試劑盒Ursolic Acid純度:≥98%
Human Annexin Ⅴ,ANXⅤ ELISA試劑盒 Ursodeoxycholic Acid純度: ≥98%
Human antiActin antibody,AAA ELISA試劑盒Curcurbitacin IIa純度:≥98%
Human Antiadrenocortical antibody,AAA ELISA試劑盒Curcubitacin IIb純度:≥98%
Human antialbumin antibody,AAA ELISA試劑盒Bullatine A純度:≥98%
Human antialphaFodrin IgG/IgA,αFodrin IgG/IgA ELISA試劑盒 Bullatine B純度:≥98%
Met Enkephalin 甲腦肽抗體 * 0.2ml 2,7Dibromo9,9dihexylfluorene
MEK1/MAPKK1/MEKK1 MEK1/MAPKK1抗體(N端) * 0.1ml 2,7Dibromo9,9dinoctylfluorene
Menin/Men1 Menin抑癌蛋白抗體 * 0.2ml 2,5Dibromothiazole
phosphoalpha Adducin(Ser726) 內(nèi)收蛋白a1抗體 * 0.1ml 2,5Dibromoselenophene
Metal ion transporter 擬南介金屬離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體 * 0.2ml 2,6Dibromonaphthalene
Mfn1 線粒體融合蛋白1抗體 * 0.1ml 1,3Dibromo7tertbutylpyrene
MGMT O6甲基DNA甲基轉(zhuǎn)移酶抗體 * 0.2ml 6,12Dibromochrysene
Metallothionein 金屬蛋白抗體 * 0.2ml 9,9Dimethyl9H9silafluorene
黃芪異黃烷苷,7,2’-二羥基-3’,4 Astragalus vary Huang Wangan, 7,2 '- two hydroxy -3', 4 規(guī)格:HPLC≥98%20mg/支
3-氧去甲雙口山苷 3- oxygen to a pair of xanthone glycosides 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
去甲基雛菊葉龍膽口山苷 Demethylation Daisy Gentiana xanthone glycosides 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
去甲基雛菊葉龍膽口山 Demethylation Daisy leaves gentisin 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
桔皮素,橙皮黃素、蜜桔黃、橘皮素;5, Hesperetin, orange, tangerine, orange peel flavonoids flavin pigment; 5, 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
木蝴蝶苷A,黃芩素-7-O-葡萄糖苷 Oroxin A, baicalein -7-O- glucoside 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
木蝴蝶苷B,黃芩素-7-O-雙葡萄糖苷, Oroxin B, baicalein -7-O- diglucoside, 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
內(nèi)酯甲 Wilforlide a 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
廣藿香 Patchoulenone 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
環(huán)巴胺 Cyclopamine 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
α-亞麻 Alpha linolenic acid 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
β-乙酰氧基異戊酰紫草素 Beta - acetoxy isovaleryl Shikonin 規(guī)格:HPLC≥98% 10mg/支
日本慢生根瘤菌規(guī)格成纖維生長(zhǎng)因子23抗體Monkey TPA (Tissue Polypeptide Antigen) ELISA Kit
成纖維生長(zhǎng)因子20抗體Monkey TG (Thyroglobulin) ELISA Kit
成纖維生長(zhǎng)因子19抗體Monkey αMSH (Alpha-Melanocyte Stimulating Hormone) ELISA Kit
成纖維生長(zhǎng)因子22抗體Monkey ABCA1(ATP-binding cassette transporter A1) ELISA Kit
胎球蛋白AMonkey CX43 (Connexin 43) ELISA Kit
叉頭蛋白L2抗體Monkey MANF (Mesencephalic Astrocyte Derived Neurotrophic Factor) ELISA Kit
叉頭相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子3抗體Monkey LTβ (Lymphotoxin Beta) ELISA Kit
鐵蛋白抗體Monkey FDP (Fibrinogen Degradation Product) ELISA Kit