公司細(xì)胞廣泛用于國內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹:
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 貨號(hào) |
鼠頰黏膜鱗癌細(xì)胞;Rca-B | 貼壁生長 | EY-X63702 |
細(xì)胞名稱 鼠頰黏膜鱗癌細(xì)胞;Rca-B
形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細(xì)胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS
傳代方法: 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況: C5
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 陰性
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冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Gelsemine
CAS No.:509-15-9
中文名:鉤吻素甲
分子式:C20H22N2O2
2(3,4二羥基基)3(βD 訂購|咨詢 高爾基體蛋白B1(GOLGB1) 規(guī)格: HPLC≥98%,5mg/vial
3,4二羥基 訂購|咨詢 高爾基蛋白73(GP73) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/vial
訂購|咨詢 高爾基蛋白73(GP73) 規(guī)格: 20mg
紫萁 訂購|咨詢 高爾基糖蛋白1(GLG1) 規(guī)格: 20mg
番瀉苷A 訂購|咨詢 高爾基蛋白3(GOLPH3) 規(guī)格: 20mg
香 訂購|咨詢 高遷移率族AT Hook蛋白1(HMGA1) 規(guī)格: 20mg
桃葉珊瑚苷 訂購|咨詢 高遷移率族AT Hook蛋白1(HMGA1) 規(guī)格: 20mg
豆甾(95%) 訂購|咨詢 高遷移率族AT Hook蛋白2(HMGA2) 規(guī)格: 20mg
8O山梔苷酯 訂購|咨詢 高遷移率族核小體結(jié)合域蛋白1(HMGN1) 規(guī)格: 20mg
青藤 訂購|咨詢 高遷移率族蛋白1(HMG1) 規(guī)格: 20mg
基(95%) 訂購|咨詢 高遷移率族蛋白1(HMG1) 規(guī)格: 20mg
沒食子 訂購|咨詢 高遷移率族蛋白1(HMG1) 規(guī)格: 100mg
墨旱蓮對(duì)照藥材 訂購|咨詢 高遷移率族蛋白1(HMG1) 規(guī)格: 1g
白頭翁對(duì)照藥材 訂購|咨詢 高遷移率族蛋白1(HMG1) 規(guī)格: 1g
紅素 訂購|咨詢 高遷移率族蛋白17(HMG17) 規(guī)格: 20mg
姜黃素 訂購|咨詢 高香草(HVA) 規(guī)格: 20mg
新 訂購|咨詢 高鐵血紅蛋白還原酶(MHBR) 規(guī)格: 20mg
次野鳶尾黃素 訂購|咨詢 高鐵血紅蛋白還原酶(MHBR) 規(guī)格: 20mg
Neutrophil Elastase/ELANE 中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶ELANE抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Tolvaptan
WT1/Wilms Tumor Protein 腎母細(xì)胞瘤蛋白抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Sulfathiazole
CBFb/PEBP2B 多瘤病增強(qiáng)了結(jié)合蛋白2β抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Sulfathiazole
BRN3B/POU4F2 腦特定蛋白Brn3B抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Cyclobenzaprine HCl
HSPBAP1 熱休克蛋白27相關(guān)蛋白1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Medetomidine HCl
C12orf23 第12號(hào)染色體開放閱讀框23抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Geniposide
RUBISCO 核糖1,5二羧酶抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Geniposide
G6PDH/H6PD 己糖6脫氫酶抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml 17Methyltestosterone
吐混20 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Tween20 含量:高純,98%
吐混40 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Tween40 含量:高純,98%
吐混60 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Tween60 含量:FMP
吐混65 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Tween65 含量:BS
吐混80 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Tween80 含量:BR,99%
吐混85 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Tween85 含量:BR
吐酒石 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Potassiumantimonyltartrate 含量:特純,98%
兔肌動(dòng)蛋白 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Actinfromrabbitmuscle 含量:B,75u/mg
拜厄斯 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:2Naphthylaminesulfonicacid 含量:BR,98%
脫氫醋 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:DHA 含量:BR
鼠頰黏膜鱗癌細(xì)胞;Rca-B北沙參亞碲鈉胨水培養(yǎng)基基礎(chǔ)規(guī)格:250g用途:用于金黃色葡萄球菌的增菌培養(yǎng)。每100ml培養(yǎng)基需另加入1%亞碲鈉0.2ml
JM肉湯添加劑規(guī)格:用途:
多粘菌素B藥敏紙片規(guī)格:300IU/片,20片/瓶用途:
化十六基三瓊脂培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于綠膿桿菌的選擇性分離培養(yǎng)
HBI單增李斯特氏菌生化鑒定條(GB)規(guī)格:5條/盒用途:用于單增李斯特氏菌的生化鑒定組成:木糖發(fā)酵管、鼠李糖發(fā)酵管、SIM生化管、3%過氧化氫酶試劑、葡萄糖、麥芽糖發(fā)酵管、發(fā)酵管、七葉苷發(fā)酵管、MR-VP(2孔),共10種生化反應(yīng)。(GB標(biāo)準(zhǔn))
鋰鹽規(guī)格:5mg/支*5用途:每支添加于100ml HB0384-6中
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長,未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。