綜合微生物的培養(yǎng)方法,包括以下步驟:
(1)前期準(zhǔn)備:(A)滅菌處理;(B)制備Biolite水;(C)檢查設(shè)備和材料;
(2)按比例配制培養(yǎng)材料;
(3)導(dǎo)入曝氣,進(jìn)行繁殖培養(yǎng);
(4)取液觀察;(a)取液;(b)稀釋菌液;(c)平板培養(yǎng);
(5)分離并檢測(cè);
(6)取液儲(chǔ)存;通過(guò)該綜合微生物培養(yǎng)方法簡(jiǎn)單可操作性強(qiáng),培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以?xún)?nèi),菌類(lèi)穩(wěn)定不發(fā)生突變,且繁殖快速。
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規(guī)格參數(shù):
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
彎曲乳桿菌規(guī)格 | Lactobacil | EY-J963818 |
資源名稱(chēng): 彎曲乳桿菌
種屬: Lactobacillus curvatus
分離基物: 酸奶,內(nèi)蒙古自治區(qū)
提供形式: 凍干粉
安全等級(jí): 1
模式菌株: no
應(yīng)用領(lǐng)域: 研究
培養(yǎng)基: MRS培養(yǎng)基:酪蛋白胨 10.0g, 10.0g,酵母粉 5.0g,葡萄糖 5.0g,乙酸鈉 5.0g,檸檬酸二銨 2.0g,Tween 80 1.0g,K2HPO4 2.0g,MgSO4.7H2O 0.2g,MnSO4.H2O 0.05g,CaCO3 20.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH6.8。
生長(zhǎng)條件: 37℃,好氧
低溫存法:
①簡(jiǎn)單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過(guò)1~2個(gè)月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3~4個(gè)月;②液氮超低溫保存法,將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線(xiàn)菌、酵母和原蟲(chóng)、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法保存。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 放線(xiàn)菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無(wú)機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過(guò)0.5%),碳源豐富容易造成酸性的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境,不利于放線(xiàn)菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營(yíng)養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線(xiàn)菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營(yíng)養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類(lèi)培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐,常采用母瓶、子瓶?jī)杉?jí)培養(yǎng),有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長(zhǎng)。原則上各種營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過(guò)程,因菌種不同而異,一般可分為一級(jí)種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱(chēng)為一級(jí)種子,把一級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱(chēng)為二級(jí)發(fā)酵。如果將一級(jí)種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過(guò)培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱(chēng)為二級(jí)種子,將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱(chēng)為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理,使用三級(jí)種子的發(fā)酵,稱(chēng)為四級(jí)發(fā)酵。
EFNB2 Others Mouse 鼠 EFNB2 / EphrinB2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
CM-R103大鼠腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
CHST11 Others Human 人 CHST11 / C4ST-1 桿狀病-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-1 膀胱變移細(xì)胞癌,T-24細(xì)胞 U251(膠質(zhì)瘤細(xì)胞)
EB病轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0927
鼠膠質(zhì)細(xì)胞MM
Collagen X Ⅹ型膠原抗體規(guī)格: 0.1ml
Contactin-6 NB-3神經(jīng)粘附蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
Claudin 1 緊密連接蛋白1抗體規(guī)格: 0.2ml
Claudin 3 緊密連接蛋白3抗體規(guī)格: 0.2ml
Claudin 4 緊密連接蛋白4抗體規(guī)格: 0.2ml
Ethidium bromide分子式:C21H20BRN3分子量:394.31
Ethiofencarb分子式:C11H15NO2S分子量:225.31
Ethofumesate分子式:C13H18O5S分子量:286.34
Ethoprophos分子式:C8H19O2PS2分子量:242.34
Ethoprophos分子式:C8H19O2PS2分子量:242.34
Ethoprophos分子式:C8H19O2PS2分子量:242.34
Ethoprophos分子式:C8H19O2PS2分子量:242.34
Ethoxysulfuron分子式:C15H18N4O7S分子量:398.39
Ethyl NacetylLtyrosinate hydrate分子式:C13H19NO5分子量:269.29
Ethyl NacetylLtyrosinate hydrate分子式:C13H19NO5分子量:269.29
Ethyl NacetylLtyrosinate hydrate分子式:C13H19NO5分子量:269.29
Ethyl NbenzoylLargininate hydrochloride分子式:C15H23CLN4O3分子量:342.82
Ethyl NbenzoylLargininate hydrochloride分子式:C15H23CLN4O3分子量:342.82
Ethyl NbenzoylLargininate hydrochloride分子式:C15H23CLN4O3分子量:342.82
Ethyl NbenzoylLargininate hydrochloride分子式:C15H23CLN4O3分子量:342.82
Ethyl Violet分子式:C31H42CLN3分子量:492.14
Ethyl Violet分子式:C31H42CLN3分子量:492.14
Ethyl Violet分子式:C31H42CLN3分子量:492.14
Ethylicin分子式:C4H10O2S2分子量:154.16
Etofenprox分子式:C25H28O3分子量:376.49
血板因子4(PF4)酶聯(lián)免疫試劑盒 ,英文名: PF4 ELISA Kit
Mouse coagulation factor VIII related aigen (F VIII -Ag) ELISA Kit Ⅷ相關(guān)抗原(FⅧ-Ag)酶聯(lián)免疫試劑盒
Mousebasicfibroblastgrowthfactor9,bFGF-9ELISAKit 性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子9(bFGF-9)酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanCollagenaseIELISAKit膠原酶I規(guī)格:48T/96T
細(xì)胞CDK2/CYCLINE激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitHGF肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子規(guī)格:48T/96T
β內(nèi)酰酶(β-lactamase)酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
過(guò)氧化酶(GSH-Px)酶聯(lián)免疫試劑盒 Rabbit Glathione peroxidase,GSH-Px ELISA Kit
殺菌肽B(CecB)酶聯(lián)免疫試劑盒 ,英文名: CecB ELISA Kit
Porcinemyeloperoxidase,MPO酶聯(lián)免疫試劑盒髓過(guò)氧化物酶(MPO)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanamyloidbetapeptide1-40,Aβ1-40酶聯(lián)免疫試劑盒β淀樣蛋白1-40(Aβ1-40)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanArachidonicAcid,AAELISAKit花生四烯(AA)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
彎曲乳桿菌規(guī)格Syndecan-1/CD138/FITC 熒光素標(biāo)記多配體聚糖抗體IgGBCL2樣15促凋亡蛋白抗體四氫吡喃Mouse MOG (Myelin Oligodendrocyte Glycoprotein) ELISA Kit
CD141/FITC 熒光素標(biāo)記凝血調(diào)節(jié)蛋白抗體IgG骨性磷酶抗體四氫吡喃Mouse AZGP1 (Zinc-alpha-2-glycoprotein) ELISA Kit
VE-cadherin/CD144/VECD/FITC 熒光素標(biāo)記上皮型鈣粘附分子/血管內(nèi)皮鈣粘蛋白抗體IgG磷化T淋巴細(xì)胞連接蛋白抗體1-硝基-3-(氧基)苯Mouse LRP-1 (Low-Density Lipoprotein-Receptor-Related Protein) ELISA Kit
CD146(MCAN)/FITC 熒光素標(biāo)記抗黑色素瘤細(xì)胞粘付分子CD146抗體IgG磷化T淋巴細(xì)胞連接蛋白抗體1-硝基-3-(氧基)苯Mouse MUC1 (Mucin 1) ELISA Kit
CD158a/KIR2DL1/FITC 熒光素標(biāo)記NK細(xì)胞抑制性受體2DL1抗體IgG腦納素前體抗體1,4-雙(二苯基膦丁烷)二化鈀Mouse CAT (Catalase) ELISA kit
CD158b2/KIR2DL3/NKAT2a/FITC 熒光素標(biāo)記NK細(xì)胞抑制性受體2DL3抗體IgG腦納素前體抗體1,4-雙(二苯基膦丁烷)二化鈀Mouse Klotho ELISA Kit
CD158D/KIR2DL4/G9P/FITC 熒光素標(biāo)記NK細(xì)胞抑制性受體2DL4抗體IgG骨髓基質(zhì)干細(xì)胞抗原1抗體甲基烯異癸酯Mouse Nrf2(Nuclear factor erythroid 2-related factor 2) ELISA Kit
CD158e/KIR3DL1/FITC 熒光素標(biāo)記NK細(xì)胞抑制性受體3DL1抗體IgG磷化蛋白酪氨激酶ATK抗體基氧基苯基硅烷Mouse FCHOL (Free cholesterol) ELISA kit