產品特點:
1、 使用方便:不需昂貴設備。
2、 可以處理各種細菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。
4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。
細胞名稱 乳腺導管瘤細胞;UACC812
形態(tài)特性: 上皮樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細胞是由LiebovitzA等于1986年從一名43歲的白人女性乳腺導管癌患者的乳腺切除腫瘤組織中分離建立的;手術前該病人曾接受過廣泛的。該細胞HER-2/neu癌基因序列有15倍的擴增;雌激素受體ER、孕激素受體PR和糖蛋白P陰性。
培養(yǎng)條件: L15:LeibovitzMedium10%FBS
傳代方法: 1:3傳代;5~7天1次。
傳代情況: 不詳
凍存條件: 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 培養(yǎng)法(-)?
產品名稱 | 乳腺導管瘤細胞;UACC812 |
生長特性 | 貼壁生長 |
貨號 | EY-X63291 |
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產品現(xiàn)貨,超低比價,產品名稱貨期短,價格優(yōu),售后齊全。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程:
1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生的細胞,以0.25%消化成單細胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生的細胞用消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
甘膽酸鈉 ;甘氨膽酸鈉Phospho-HER4/ErbB4 (Tyr984) Antibody3,5-二甲基金剛鹽酸鹽
甘露;D-甘露糖ALK (31F12) Mouse mAb2-氧代-丁基酸二甲酯
D-半鹽酸鹽一水CIITA Antibody叔戊氧基
鈣蛋白酶抑制劑II(進口)SKAR α/β Antibody三唑鈉
炔孕酮/素(標準品)Frizzled5 Antibody甲氨基-甲酸
炔孕酮/素α-Amylase (D55H10) XP® Rabbit mAb異基甲
D-α-Amylase (D55H10) XP® Rabbit mAb6-溴-3,二氫-1H-2-萘酮
DL-VIP (D8J1V) Rabbit mAb (IHC Formulad)2,4,6-*酰
DL-Mouse (E1D5H) mAb IgG3 Isotype Control鄰羥基對氨基甲酸甲酯
L-蛋氨酸;ERp44 (D17A6) XP® Rabbit mAb5-酸吡哆
DL-氨酸ERp44 (D17A6) XP® Rabbit mAb溴-2-氟聯(lián)
DL-天冬酰,一水MMP-7 (D4H5) XP® Rabbit mAb5,6-二
DL-氨酸MMP-7 (D4H5) XP® Rabbit mAb1-甲基-咪唑甲酸
DL-PPIG Antibody2-溴-5-甲基噻唑
DL-;蛋氨酸Phospho-PPIG (Ser376) Antibody溴甲酯
DL-天冬氨酸Phospho-Rictor (Thr1135) (D30A3) Rabbit mAb溴-2-氟-5-
DL-谷氨酰Phospho-Rictor (Thr1135) (D30A3) Rabbit mAb3,5-二甲基-羥基甲
DL-IRAP Antibody2-哌啶甲酸甲酯
DL-氨酸甲酯鹽酸鹽FastScan™ Phospho-Vimentin (Ser56) ELISA Kit環(huán)硫烷
L-5酯Enolase-1 Antibody2--
N-酰-DL-Enolase-1 Antibody酸
N-碳芐氧基賴氨酸,N6-Cbz-L-賴氨酸PI3 Kinase Class III Antibody
(標準品)LSP1 Antibody基*基三
Plexin A1 Antibody羥基-6-甲基-2-吡啶甲
H-Met-OtBu.HCLVISTA (D5L5T) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)5--2-吡啶
麥芽糖Bak Antibody2-氨基-基吡啶
L-酰AsCpf1 (Strain <i>BV3L6</i>) Antibody醋酸銠
L-甲酯鹽酸鹽Phospho-HDAC3 (Ser424) Antibody1H,1H-五氟
N-酰-L-酯DNA-PKcs (E6U3A) Rabbit mAb2-(溴甲基)酸甲酯
N-酰-DL-Plexin A4 (C5D1) Rabbit mAb6-溴己酸
N-甲酰-DL-Phospho-VEGF Receptor 2 (Tyr1059) (D5A6) Rabbit mAb五氟水合物, CH
L-叔丁酯GFAT1 Antibody五氟酸
O-芐基-L-SATB2 (E4N4A) Rabbit mAbN-(基基)
O-芐基-L-芐酯鹽酸鹽CD44 (IM7) Rat mAb (PerCP-Cy5.5® Conjuga)1-基-羥基-1,2,三唑
O-芐基-L-甲酯鹽酸鹽PDHK1 (C47H1) Rabbit mAbN-芐基咪唑
L-正叔丁酯鹽酸鹽PDHK1 (C47H1) Rabbit mAb(R)-1,2-
瘤細胞;BT-325形態(tài)特性: 成纖維細胞樣生長特性: 貼壁生長Anti-S100B Monoclonal Antibody
小鼠胚胎成纖維細胞;3T3-L1形態(tài)特性: 成纖維細胞樣生長特性: 貼壁生長Anti-RIPK3 Polyclonal Antibody
小鼠肺細胞;MML1形態(tài)特性: 成纖維細胞樣生長特性: 貼壁生長Anti-KRT17 Monoclonal Antibody
黃胸鼠肺成纖維細胞;YCR形態(tài)特性: 成纖維細胞樣生長特性: 貼壁生長Anti-METTL3 Polyclonal Antibody
灰松鼠皮膚細胞;GSQS1形態(tài)特性: 成纖維細胞樣生長特性: 貼壁生長Anti-SIRT1 Polyclonal Antibody
小鼠結締組織L細胞株929克??;L-929[L929]形態(tài)特性: 成纖維細胞樣生長特性: 貼壁生長Anti-CAMK4 Polyclonal Antibody
小鼠骨髓瘤細胞;Sp2/0-Ag14形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣;圓形生長特性: 懸浮生長Anti-IKBA Polyclonal Antibody
乳腺導管瘤細胞;UACC812大鼠(Cortisol)ELISA試劑盒CGELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。
大鼠促甲狀腺素(TSH)ELISA試劑盒CGELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。
大鼠骨鈣素/骨谷氨蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒cGMPELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。
大鼠降鈣素(CT)ELISA試劑盒cGMPELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。
大鼠遲現(xiàn)抗原(VLA)ELISA試劑盒cGMPELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。
大鼠大內皮素(BigET)ELISA試劑盒CGRPELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。
大鼠前心鈉肽(Pro-ANP)ELISA試劑盒CGRPELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。
大鼠雌二醇受體(ER)ELISA試劑盒CGRPELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。