綜合微生物的培養(yǎng)方法,包括以下步驟:
(1)前期準(zhǔn)備:(A)滅菌處理;(B)制備Biolite水;(C)檢查設(shè)備和材料;
(2)按比例配制培養(yǎng)材料;
(3)導(dǎo)入曝氣,進(jìn)行繁殖培養(yǎng);
(4)取液觀察;(a)取液;(b)稀釋菌液;(c)平板培養(yǎng);
(5)分離并檢測(cè);
(6)取液儲(chǔ)存;通過(guò)該綜合微生物培養(yǎng)方法簡(jiǎn)單可操作性強(qiáng),培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以內(nèi),菌類(lèi)穩(wěn)定不發(fā)生突變,且繁殖快速。
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規(guī)格參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
繩狀青霉(斜面)品牌 | Penicilliu | EY-J963373 |
資源名稱: 繩狀青霉(斜面)
種屬: Penicillium funiculosum
提供形式: 斜面
安全等級(jí): 1
模式菌株: no
應(yīng)用領(lǐng)域: 用于葡聚糖。
培養(yǎng)基: 綜合PDA:馬鈴薯煮汁1000mL,二氫鉀二氫鉀 3g,鎂 1.5g,葡萄糖 20g,1 10mg,瓊脂 20g,pH自然。馬鈴薯煮液:200g馬鈴薯,去皮,切塊,放入蒸餾水中煮沸30min,取濾液定容至1000mL,備用。121℃,15min。
生長(zhǎng)條件: 25℃,好氧
低溫存法:
①簡(jiǎn)單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過(guò)1~2個(gè)月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3~4個(gè)月;②液氮超低溫保存法,將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲(chóng)、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法保存。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無(wú)機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過(guò)0.5%),碳源豐富容易造成酸性的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營(yíng)養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營(yíng)養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類(lèi)培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐,常采用母瓶、子瓶?jī)杉?jí)培養(yǎng),有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長(zhǎng)。原則上各種營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過(guò)程,因菌種不同而異,一般可分為一級(jí)種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級(jí)種子,把一級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為二級(jí)發(fā)酵。如果將一級(jí)種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過(guò)培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級(jí)種子,將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理,使用三級(jí)種子的發(fā)酵,稱為四級(jí)發(fā)酵。
Colletotrichum│orbiculare (Berk. & Mont.) Arx 中文名稱:葫蘆叢殼Colletotrichum│orbiculare (Berk. & Mont.) Arx分離基物:南瓜葉片提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:26--30存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:98%
Streptomyces│virginiae Grundy et al. 中文名稱:#弗吉尼亞鏈霉菌Streptomyces│virginiae Grundy et al.分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:益生菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:12生長(zhǎng)條件:30存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:98%
Phytophthora│capsici Leonian 中文名稱:辣椒疫病Phytophthora│capsici Leonian分離基物:辣椒葉片提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:NB生長(zhǎng)條件:26--30存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:98%
Streptomyces│cyaneogriseus Yan et al. 中文名稱:#深藍(lán)鏈霉菌Streptomyces│cyaneogriseus Yan et al.分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:益生菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:12生長(zhǎng)條件:30存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:95%
Streptomyces│flavus Waksman et Henrici 中文名稱:#黃色鏈霉菌Streptomyces│flavus Waksman et Henrici分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:益生菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:12生長(zhǎng)條件:30存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:95%
Alrnaria│sp. 中文名稱:#鏈格孢屬Alrnaria│sp.分離基物:梨果實(shí)提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:25-28存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:97%
Psathyrella│candolleana (Fr.) Maire 中文名稱:#薄花邊傘Psathyrella│candolleana (Fr.) Maire分離基物:子實(shí)體提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:28存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:97%
Balansia│take (Miyake) Hara 中文名稱:*竹瘤座菌Balansia│take (Miyake) Hara分離基物:竹叢枝頂端葉鞘提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:66生長(zhǎng)條件:25-28存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:99%
繩狀青霉(斜面)品牌APNG/MPG N-甲基嘌呤DNA糖基化酶秦皮苷; 白蠟樹(shù)苷3- 巰基正酯HSP-90Alpha(Heat Shock Protein 90Alpha ) 熱休克蛋白90α(抗原)
APOD 載脂蛋白D抗體奇任,奇壬2--5-甲(易)HSP-90 Beta (heat sock protein-90 Beta) 熱休克蛋白-90β (抗原)
APOH 載脂蛋白H抗體高良姜素2--5-甲(易)IASPP(inhibitory member of the ASPP family) 腫瘤細(xì)胞凋亡ASPP家族的另一個(gè)成員(抗原)
APOE 載脂蛋白E抗體比枯枯靈;畢靈;荷包牡丹2--5-甲(易)CD54/ICAM-1 細(xì)胞間粘附分子-1
APOJ 載脂蛋白J抗體異槲皮苷4--2-三基異酯IL-1 Beta(Interleukin-1 Beta) 白介素1β(白細(xì)胞介素-1β)(多肽抗原)
Apollon/BIRC6 Apollon凋亡抑制蛋白抗體乙酰紫堇靈; 乙酰紫堇靈3-(二苯基膦基)胺IL1RAPL1 (Interleukin 1 receptor accessory protein-like 1) 白介素受體相關(guān)蛋白樣1前體蛋白(抗原)
APP/ABPP 淀樣肽前體蛋白抗體三葉豆紫檀苷3-(二苯基膦基)胺IL-6(Interleukin-6) 白介素6(白細(xì)胞介素-6)(多肽抗原)
APP/ABPP APP/ABPP淀樣肽前體蛋白抗體苷(R)-(+)-碳烯酯IL-10(Interleukin-10) 白介素10(白細(xì)胞介素-10)(抗原)