細(xì)胞名稱 纖維肉瘤;HT-1080
形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 這株細(xì)胞含有活化的N-ras癌基因。
培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
傳代方法: 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況: PN5
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 陰性
公司細(xì)胞廣泛用于國內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹:
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
纖維肉瘤;HT-1080 | 貼壁生長 | EY-X63919 |
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冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時間過長,未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
畸胎瘤細(xì)胞源性生長因子檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 雜交瘤細(xì)胞株;DT-03形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣PC-cell derived growth factor
幽門螺桿菌細(xì)胞素相關(guān)基因蛋白A抗體檢測試劑盒
僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用N-Fmoc-N'-三苯甲基-D-谷氨酰Human THEM4 ELISA Kit
雜交瘤;whiov-P24C-MoAb拉丁屬名: Aspergillus niger1-(2-氯乙基)哌啶鹽酸鹽Human THNSL2 ELISA Kit
雜交瘤;2C6A6用途: 害蟲生物防治1-(2-氯乙基)哌啶鹽酸鹽Human THOC1 ELISA Kit
雜交瘤;2F12注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用1-(2-氯乙基)哌啶鹽酸鹽Human TGIF2LX ELISA Kit
小鼠骨髓多能干;mMMSC拉丁屬名: Fusarium equiseti2-溴-4-硝基-1-(三氟甲氧基)苯Human THOC2 ELISA Kit
雜交瘤;3B1A15拉丁屬名: Lactobacillus salivarius2-溴-4-硝基-1-(三氟甲氧基)苯Human TGM4 ELISA Kit
雜交瘤;4B14A1拉丁屬名: Brevundimonas vesicularis5-羥基-2-金剛烷酮Human TFDP2 ELISA Kit
雜交瘤;2E8A5注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用5-羥基-2-金剛烷酮Human TFDP1 ELISA Kit
雜交瘤;7A6A1注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用5-羥基-2-金剛烷酮Human
子的小鼠癌細(xì)胞;Ca761-bFGF-EGFP形態(tài)特性: 上皮樣Dipeptidyl Peptidase
纖維肉瘤;HT-1080甲基11013-97-1中文別名:甲基橙皮甙,3-甲基
英文名:Methyl hesperidin
CAS登錄號:11013-97-1
分子式:C29H38O15
分子量:626
分子結(jié)構(gòu):
外觀:黃色或淡黃色結(jié)晶性粉末
規(guī)格:20mg/支
純度:≥ 98%
用途:用于含量測定/鑒定/藥理實(shí)驗(yàn)等。
提取來源:(橙皮甙)甲基化衍生而來
溶解性:乎不溶于水(難溶于 水),不溶于、、和,微溶于 和乙醇,易溶于性溶液、、、熱醋、熱和熱乙醇。
熔點(diǎn):251~252℃
藥理藥效:本品為水溶性多種二氫黃型甲基的混合物。具有維生素P一樣的效能,可增強(qiáng)的作用,并有較強(qiáng)的抗病和抗菌作用,大劑量能抑制流感病的繁殖;能抑制導(dǎo)致皮膚變黑的酪氨酶的作用,可用于治療黑斑、雀斑等皮膚病。具有維持血管正常通透性,提高毛細(xì)血管抵抗力,增強(qiáng)毛細(xì)血管的彈性與韌性,防止和治療毛細(xì)血管出血,牙齦出血等。具有與同樣的藥理作用、能加強(qiáng)毛細(xì)血管抵抗力,使毛細(xì)血管滲透正常和防止動脈硬化所引起的血管紊亂;與配合使用療效更佳??捎糜诒浅鲅⒁暰W(wǎng)膜出血、齒齦、齒槽出血。胃腸道出血,痔出血等,以及手術(shù)前或手術(shù)后的出血預(yù)防和治療。
貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光
有效期: 2年