需要自備的器材:
1.斯氏普羅威登斯菌PCR試劑盒說明書儀器:分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。
特點:
1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照,便于分析試驗結(jié)果。?
以下是斯氏普羅威登斯菌PCR試劑盒說明書的詳細說明書:
產(chǎn)品名稱 | 斯氏普羅威登斯菌PCR試劑盒說明書 |
英文名稱 | Providencia stuartiPCR |
編號 | EY00P1067 |
斯氏普羅威登斯菌PCR試劑盒說明書注意事項:
1.基礎(chǔ)程序;
2.擴增溫度和延伸溫度;
3.反應(yīng)時間;
4.循環(huán)次數(shù);
5.PCR 反應(yīng)液的配制;
6.PCR技術(shù)的基本原理;
7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);
8.PCR擴增產(chǎn)物;
9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
使用方法:
注:斯氏普羅威登斯菌PCR試劑盒說明書所有試劑使用前需*解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關(guān)說明書;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。
2. 擴增試劑準備(PCR前準備區(qū))
取N個(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應(yīng)管)。
組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴增區(qū)。
以下是斯氏普羅威登斯菌PCR試劑盒說明書的相關(guān)產(chǎn)品,了解更多進口PCR試劑盒點擊進入。
真皮成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
ERBB2 Others Cynomolgus 食蟹猴 HER2 / ErbB2 人細胞裂解液 (陽性對照)
中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1
中國倉鼠肺細胞;CHL 卵巢癌細胞,NIH:OVCAR-3細胞 L8824細胞,草魚肝臟細胞
人胚皮膚成纖維細胞;CCC-ESF-1
HA Others H3N2 甲型流感 H3N2 (A/Wisconsin/67/X-161/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照)
人骨髓間充質(zhì)干細胞(hMSCs) Human
CM-M098小鼠內(nèi)臟脂肪細胞*培養(yǎng)基100mL
15. 視覺細胞系統(tǒng)
小鼠原B細胞株;BaF3 小鼠肺大靜脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02
TNFRSF8 Others Human 人 TNFRSF8 / CD30 人細胞裂解液 (陽性對照)
MN-h, 小鼠海馬神經(jīng)元
BPH-1, 人前列腺增生細胞 Human 現(xiàn)貨
MN-s, 小鼠紋狀體神經(jīng)元
RL95-2, 人內(nèi)膜腺癌細胞系 Human 現(xiàn)貨
志賀氏菌增菌肉湯 英文名稱; Shigiella Broth 規(guī)格; 250g
志賀氏菌顯色培養(yǎng)基 英文名稱; 規(guī)格; 1000ml
柯氏尿素瓊脂 英文名稱; 規(guī)格; 250g
MLCB寒天培地 英文名稱; MLCB Agar 規(guī)格; 250g
GN增菌液(10ml) 英文名稱; 規(guī)格; 10ml*20
腦心浸液瓊脂(BHIA) Brain Heart infusion Agar 250g
Pfizer腸球菌選擇性瓊脂(PSE瓊脂) Pfizer Enterococcus Selective Agar 250g
6.5%NaCl葡萄糖瓊脂 6.5% NaCl Dextrose Agar 250g
哥倫比亞血瓊脂基礎(chǔ)(改良) 250g
乙基紫疊氮鈉肉湯(litsky肉湯) 250g
斯氏普羅威登斯菌PCR試劑盒說明書多價蛋白胨-酵母膏(PY)培養(yǎng)基 用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的培養(yǎng)(SN標準)用途:用于產(chǎn)氣莢膜梭菌糖(醇)發(fā)酵的基礎(chǔ)培養(yǎng)基。成分(g/L)多價胨 20.0酵母膏 5.0氯化鈉 5.0pH值6.9 ± 0.1 25℃用法稱取本品 30.0g,并加入 10g糖或醇,加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,分裝到螺帽試管內(nèi),每管 9ml,121℃高壓滅菌 15 分鐘,備用。
皰肉培養(yǎng)基基礎(chǔ) 加入粒,用于肉毒梭菌及厭氧梭狀芽孢桿菌的檢驗(GB標準)用途:用于厭氧菌的增菌培養(yǎng)。成分(g/L)蛋白胨 30.0浸粉 3.0酵母浸粉 5.0可溶性淀粉 2.0葡萄糖 3.0 5.0pH值7.0 - 7.4 25℃用法稱取本品 48.0g,加入 1000ml蒸餾水,加熱溶解并不停攪拌,煮沸 1 分鐘。取碎肉渣分裝 15mm×150mm 試管約 2-3cm高,將上述液體培養(yǎng)基分裝至每管內(nèi)超過肉渣表面約 1cm。121℃高壓滅菌 15 分鐘備用。質(zhì)量控制和典型特征36±1℃培養(yǎng) 24-72 小時,待出現(xiàn)生長特征(培養(yǎng)液渾濁、產(chǎn)氣、出現(xiàn)異味)后進行鏡檢和接種到分離培養(yǎng)基中(如鐵瓊脂)。反之,則報告陰性。
皰肉粒 加入皰肉基礎(chǔ)中,配成皰肉培養(yǎng)基加入皰肉基礎(chǔ)中,配成皰肉培養(yǎng)基
液體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基 用于產(chǎn)氣莢膜梭菌確證試驗的細菌培養(yǎng)(GB.SN標準)用途:用于藥品、生物制品無菌檢測,檢測好氧菌和厭氧菌。成分(g/L)酪胨(水解) 15.0酵母浸出粉 5.0葡萄糖 5.0硫乙醇酸鈉 0.5L- 0.5氯化鈉 2.5刃天青 0.001瓊脂 0.75pH值7.1 ± 0.2 25℃用法稱取本品 29.25g,加熱攪拌溶解于 1000ml 純化水中,分裝適宜容器 ,其裝量與容器高度的比例應(yīng)符合,培養(yǎng)結(jié)束后培養(yǎng)基氧化層 ( 粉紅色 ) 不超過培養(yǎng)基深度的 1/2 。121℃高壓滅菌 15 分鐘迅速冷卻。在供試品接種前,培養(yǎng)基氧化層高度不得超過培養(yǎng)基深度的 1/5 。否則,須經(jīng)100℃水浴加熱至粉紅色消失( 不得超過 20 分鐘 ),迅速冷卻 ,只限加熱一次,并應(yīng)防止被污染。