細(xì)胞名稱 恒河猴肺細(xì)胞;RM-L1
形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細(xì)胞系來源于一雄性獼猴的肺組織。1985年中國科學(xué)院昆明細(xì)胞庫建立。
培養(yǎng)條件: McCoy's5AMedia(ModifiedwithTricine)15%NBS
傳代方法: 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況: P4
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 熒光法(-)
公司細(xì)胞廣泛用于國內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹:
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
恒河猴肺細(xì)胞;RM-L1 | 貼壁生長 | EY-X63745 |
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冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時間過長,未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
Quercetin 4'-O-galactoside
CAS No.:381728-34-3
中文名:槲皮素-4'-O-半乳糖苷
分子式:C21H20O12
(±)原蘇木素B 訂購|咨詢 普列克底物蛋白(PLEK) 規(guī)格: 20mg
柴胡皂苷a 訂購|咨詢 普列克底物蛋白2(PLEK2) 規(guī)格: 20mg
醋 訂購|咨詢 普列克底物蛋白同源物樣域家族A成員2(PHLDA2) 規(guī)格: 50mg
絞股藍(lán) 訂購|咨詢 糞卟啉原氧酶(CPOX) 規(guī)格: 2g
兒茶 訂購|咨詢 濕結(jié)合蛋白(RTBDN) 規(guī)格: 0.5g
石見穿 訂購|咨詢 滑行蛋白α(TXLNα) 規(guī)格: 10g
柴胡 訂購|咨詢 滑行蛋白β(TXLNβ) 規(guī)格: 0.5g
對羥基酯 訂購|咨詢 滑行蛋白γ(TXLNγ) 規(guī)格: 100mg
戰(zhàn)骨 訂購|咨詢 游離三狀腺原(fT3) 規(guī)格: 8g
環(huán)維黃楊星D 訂購|咨詢 游離狀腺素(fT4) 規(guī)格: 20mg
冬凌草素 訂購|咨詢 游離脂肪受體1(FFAR1) 規(guī)格: 20mg
伐昔洛韋 訂購|咨詢 滋養(yǎng)層特異性糖蛋白(TPBG) 規(guī)格: 100mg
異槲皮苷 訂購|咨詢 富酪蛋白(STATH) 規(guī)格: 20mg
石杉 訂購|咨詢 窖蛋白(CAV1) 規(guī)格: 50mg
賽門苷I 訂購|咨詢 窖蛋白(CAV1) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支;
老鸛草素 訂購|咨詢 窖蛋白(CAV1) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
歐夾竹桃苷 訂購|咨詢 窖蛋白(CAV1) 規(guī)格: HPLC≥98%;5mg/支
川楝素 訂購|咨詢 窖蛋白(CAV1) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
ALS2CR8 肌側(cè)索硬2染色體區(qū)域候選蛋白8抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Tirapazamine(SR259075; Win59075; SR4233)
Corin 心臟特異性絲蛋白酶抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Dextrin
GPR55 蛋白偶聯(lián)受體55抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Benzidamine HCl
LAP3 亮基肽酶3抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Sephadex G50
LMW Kininogen/Kininogen 1 低分子量生長促進(jìn)因子抗體(激肽原1) 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Sephadex G50
KMB1/Maxi Potassium channel beta 鈣激活通道蛋白β1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml (S)(+)Mandelic acid
P2RX4 三腺苷門控陽離子通道蛋白抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml (R)(−)Mandelic acid
ATP6IP2 ATP酶H+轉(zhuǎn)運(yùn)溶酶體輔助蛋白2抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml 1Aminohydantoin Hydrochloride
正辛基谷 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:OGP 含量:精制級,150000000u/g
正辛 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:SodiumCaprylate 含量:AR,90%
正已 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Hexanoicacid 含量:BR,85%
芝加哥天藍(lán)6B 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Chicagoskyblue6B 含量:BS,85%
脂多糖 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:LPS 含量:高純,98%
脂肪水解酶 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Lipase(Candida) 含量:BR,類型F00,130u/mg
脂蠟 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:StearicAcid 含量:CP,98.5%
脂壁 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Lipoteichoicacid 含量:CP,99%
脂酶 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Lipase(pocinepancreas) 含量:生物技術(shù)級,0.5u/mg
脂質(zhì)體2000 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Lipofectamine2000TransfectionReagent 含量:AR,99%
恒河猴肺細(xì)胞;RM-L1肉湯基礎(chǔ)規(guī)格:250g用途:用于蠟樣芽孢桿菌的試驗(yàn)
李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基規(guī)格:1000ml用途:用于李斯特氏菌的顯色培養(yǎng),單增李斯特氏菌顯藍(lán)色,外圍有一不透明環(huán)
孟加拉紅培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于食品中霉菌及酵母菌總數(shù)測定
精氨肉湯規(guī)格:250g用途:用于游泳池中假單胞菌檢測
胰酪胨大豆多粘菌素肉湯基礎(chǔ)(GB)規(guī)格:(2.25萬單位)用途:2.25萬單位
纖維二糖-(CC)瓊脂規(guī)格:250g用途:用于弧菌的分離培養(yǎng)