細胞名稱 神經母細胞瘤細胞;SK-N-BE(2)
形態(tài)特性: 神經母細胞
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 1972年11月從一們多次及放療的擴散性神經母細胞瘤患兒骨髓穿刺物中建立了SK-N-BE(2)神經母細胞瘤細胞株。該細胞顯示中等水平的多巴胺-β-羥基酶活性。有報道稱SK-N-BE(2)細胞的飽和濃度超過1x106細胞/平方厘米。細胞形態(tài)多樣,有的有長突觸,有的呈上皮細胞樣。細胞會聚集,形成團塊并浮起。
培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)優(yōu)質胎牛血清,10%
傳代方法: 消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
傳代情況: P(36+5)
凍存條件: 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 陰性
公司細胞廣泛用于國內院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。下列產品詳細介紹:
產品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
神經母細胞瘤細胞;SK-N-BE(2) | 貼壁生長 | EY-X63938 |
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冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
脫鎂螯合酶檢測試劑盒
3非食用5-溴-2-羥吲哚Human SPRR1B ELISA Kit
雜交瘤株;LT005拉丁屬名: Aspergillus fumigatus Fresen5-溴-2-羥吲哚Human SPZ1 ELISA Kit
雜交瘤株;LT004用途: 分類5-硝基吲哚-2-酮Human SPRR2D ELISA Kit
雜交瘤株;SC20150701D注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用5-硝基吲哚-2-酮Human SQRDL ELISA Kit
雜交瘤株;SC20150701A拉丁屬名: Xenophilus azovorans5-(甲基硫代)噻吩-2-羧酸Human SQLE(Squalene monooxygenase) ELISA Kit
雜交瘤株;2G9A3-35H11拉丁屬名: Debaryomyces hansenii5-(甲基硫代)噻吩-2-羧酸Human SPRR2F ELISA Kit
雜交瘤株;5H1E9E8D7H12拉丁屬名: Enterobacter sakazakii果糖二酮Human SRA1 ELISA Kit
雜交瘤株;CD98-3H3用途: 教學科研果糖二酮Human CA4(Carbonic anhydrase 4) ELISA Kit
雜交瘤株;CD98-2D3拉丁屬名: Shewanella sp.2-噻吩乙Human SPO11 ELISA Kit
雜交瘤株;CD98-2C8拉丁屬名: Bifidobacterium adolescentis Reuter2-噻吩乙Human SPATA7 ELISA Kit
雜交瘤株;FABP 4C2拉丁屬名: Amauroderma rugosum苊烯Human SPATA6 ELISA Kit
雜交瘤株;1A6D3注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用苊烯Human SPATS2L ELISA Kit
雜交瘤株;2C11D12拉丁屬名: Shewanella haliensis胸腺嘧啶-1-乙酸Human SPCS1 ELISA Kit
雜交瘤株;1H7F8拉丁屬名: Dermatophilus congolensisFmoc-β-homoaspartic acidHuman SPHK1 ELISA Kit
雜交瘤株;3H3F6拉丁屬名: Sporobolomyces salmonicolor4-氨基-2-氯苯甲Human SPDYA ELISA Kit
雜交瘤株;7H8注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用4-氨基-2-氯苯甲Human SPHK1-Phospho-Ser225 ELISA Kit
雜交瘤株;2-189-H-1拉丁屬名: Staphylococcus equorum4-氨基-2-氯苯甲Human CADM3(Cell adhesion molecule 3) ELISA Kit
雜交瘤株;43-H-8規(guī)格: 20片/盒,2盒3-氟-5
神經母細胞瘤細胞;SK-N-BE(2)D-四氫藥根13063-54-2英文名:(R)-(+)-Corypalmine
英文別名:dl-Tetrahydrojatrorrhizine
CAS登錄號:13063-54-2
分子式:C20H23NO4
分子量:341.16
分子結構:
規(guī)格:20mg/支
純度:≥ 98%
用途:用于含量測定/鑒定/藥理實驗等。
提取來源:夏天無原藥材
藥理藥效:藥根在治療炎癥、細菌和病感染、糖尿病、心血管疾病、精神疾病等多方面具有藥效作用。
貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光
有效期: 2年