綜合微生物的培養(yǎng)方法,包括以下步驟:
(1)前期準(zhǔn)備:(A)滅菌處理;(B)制備Biolite水;(C)檢查設(shè)備和材料;
(2)按比例配制培養(yǎng)材料;
(3)導(dǎo)入曝氣,進(jìn)行繁殖培養(yǎng);
(4)取液觀察;(a)取液;(b)稀釋菌液;(c)平板培養(yǎng);
(5)分離并檢測(cè);
(6)取液儲(chǔ)存;通過(guò)該綜合微生物培養(yǎng)方法簡(jiǎn)單可操作性強(qiáng),培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以?xún)?nèi),菌類(lèi)穩(wěn)定不發(fā)生突變,且繁殖快速。
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規(guī)格參數(shù):
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
酸魚(yú)乳桿菌 | Lactobacil | EY-J963587 |
資源名稱(chēng): 酸魚(yú)乳桿菌
種屬: Lactobacillus acidipiscis
分離基物: 生命營(yíng)養(yǎng)液
提供形式: 凍干物
安全等級(jí): 1
模式菌株: no
培養(yǎng)基: MRS培養(yǎng)基:酪胨 10.0g,牛肉粉 8.0g,酵母粉 4.0 g,葡萄糖 20.0 g,鎂 0.2 g,乙酸鈉 5.0 g,檸檬酸三銨 2.0 g,二氫鉀氫二鉀 2.0 g,錳 0.05 g,吐溫80 1.0 g,蒸餾水 1000mL。pH6.2±0.2。121℃,15min。
生長(zhǎng)條件: 37℃,微好氧
存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
低溫存法:
①簡(jiǎn)單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過(guò)1~2個(gè)月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3~4個(gè)月;②液氮超低溫保存法,將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲(chóng)、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法保存。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無(wú)機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過(guò)0.5%),碳源豐富容易造成酸性的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營(yíng)養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營(yíng)養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類(lèi)培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐,常采用母瓶、子瓶?jī)杉?jí)培養(yǎng),有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長(zhǎng)。原則上各種營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過(guò)程,因菌種不同而異,一般可分為一級(jí)種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱(chēng)為一級(jí)種子,把一級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱(chēng)為二級(jí)發(fā)酵。如果將一級(jí)種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過(guò)培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱(chēng)為二級(jí)種子,將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱(chēng)為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理,使用三級(jí)種子的發(fā)酵,稱(chēng)為四級(jí)發(fā)酵。
Mycoplasma│mycoides subsp capri 中文名稱(chēng):絲狀支原體山羊亞種Mycoplasma│mycoides subsp capri分離基物:山羊傳染性胸膜肺炎的肺組織提供形式:凍干物安全等級(jí):4模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:滅活疫苗培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:57生長(zhǎng)條件:37存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法; 純度:≥98%
Clostridium│novyi 中文名稱(chēng):諾維氏梭菌Clostridium│novyi分離基物:黑疫綿羊肝提供形式:凍干物安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:用于科研及血清定型培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:52生長(zhǎng)條件:37存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法; 純度:≥98%
Mycobacrium│bovis 中文名稱(chēng):牛分枝桿菌Mycobacrium│bovis分離基物:結(jié)核病奶牛提供形式:凍干物安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:科研及血清定型培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:61生長(zhǎng)條件:37存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法; 純度:99%
Mycobacrium│iacellulare 中文名稱(chēng):胞內(nèi)分枝桿菌Mycobacrium│iacellulare分離基物:病料提供形式:凍干物安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:鳥(niǎo)-胞內(nèi)分枝桿菌分離株血清定型培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:61生長(zhǎng)條件:37存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法; 純度:99%
Mycobacrium│paratuberculosis 中文名稱(chēng):副結(jié)核分枝桿菌Mycobacrium│paratuberculosis分離基物:副結(jié)核病牛糞便提供形式:凍干物安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:科研及血清定型培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:182生長(zhǎng)條件:37存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法; 純度:99%
Mycoplasma│ovipneumoniae 中文名稱(chēng):綿羊肺炎支原體Mycoplasma│ovipneumoniae分離基物:肺炎綿羊組織提供形式:凍干物安全等級(jí):2模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:分離株血清定型培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:400生長(zhǎng)條件:37存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法; 純度:99%
Trypanosoma│equiperdum 中文名稱(chēng):馬媾疫錐蟲(chóng)Trypanosoma│equiperdum分離基物:病馬和尿道粘膜提供形式:其他安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:可用于抗原和陽(yáng)性血清,藥物篩選試驗(yàn)培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:0生長(zhǎng)條件:37存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法; 純度:99%
Aviadenovirus│Avian adenovirus 7 中文名稱(chēng):禽腺病(7型)Aviadenovirus│Avian adenovirus 7分離基物:病料提供形式:凍干物安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:血清型參考株培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:0生長(zhǎng)條件:37存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法; 純度:98%
酸魚(yú)乳桿菌Morphine 抗體右旋糖酐分子量D0Entinostat (MS-275)Human KERA (Keratocan) ELISA Kit
Morphine 抗體右旋糖酐分子量D15-溴煙乙酯Human VCL (Vinculin) ELISA Kit
Torc2/Crtc2 CREB轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC2抗體右旋糖酐分子量D25-溴煙乙酯Human DEFα5 (Defensin Alpha 5, Paneth Cell Specific) ELISA Kit
Phospho-Torc2/Crtc2 (Ser171) 磷化CREB轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC2抗體右旋糖酐分子量D35-溴煙乙酯Human FSA (Fetal Sulfoslycoprotein Antigen) ELISA Kit
Morphine 單克隆抗體右旋糖酐分子量D43,4,5-三Human EED (Embryonic Ectoderm Development) ELISA Kit
Amphetamine 苯胺單克隆抗體()右旋糖酐分子量D53,4,5-三Human CTAGE (Cutaneous T-Cell Lymphocyte Associated Antigen) ELISA Kit
MEK1/2(MAPKK1) 絲裂原活化蛋白激酶激酶1抗體右旋糖酐分子量D63-氨基-5-吡Human DPT (Dermatopontin) ELISA Kit
MEK2/MAPKK2 絲裂原活化蛋白激酶激酶2抗體右旋糖酐分子量D73-氨基-5-吡Human SRF/IF (Skin Reactive Factor/Inflammatory Factor) ELISA Kit