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產(chǎn)品介紹

Grace昆蟲(chóng)培養(yǎng)基（Grace's Insect Medium）最初設(shè)計(jì)為支持澳大利亞白星橙天蠶蛾 (Antherea eucalypti) 細(xì)胞 的生長(zhǎng)，是對(duì)Wyatt培養(yǎng)基的改良，以更接近 Antherea 血淋巴。Grace用這種培養(yǎng)基建立了第一個(gè)連續(xù)細(xì)胞系。適 當(dāng)補(bǔ)充添加劑后，該基本培養(yǎng)基已用于培養(yǎng)各種昆蟲(chóng)細(xì)胞，包括多種鱗翅類(lèi)以及一些雙翅類(lèi)昆蟲(chóng)。該培養(yǎng)基主要作為 培養(yǎng)基基礎(chǔ)，用于培養(yǎng)Sf9 和Sf21細(xì)胞系，也用于其它鱗翅類(lèi)昆蟲(chóng)細(xì)胞系的生長(zhǎng)和維持。

TNM-FH昆蟲(chóng)培養(yǎng)基是改進(jìn)的Grace's昆蟲(chóng)培養(yǎng)基，適當(dāng)補(bǔ)充添加劑后，可用于各種鱗翅類(lèi)昆蟲(chóng)細(xì)胞的培養(yǎng)。

本產(chǎn)品含有多類(lèi)細(xì)胞培養(yǎng)所需的氨基酸、維生素、無(wú)機(jī)鹽等多種成分，但不含蛋白質(zhì)、脂類(lèi)或任何生長(zhǎng)因子，故此產(chǎn)品需搭配血清或無(wú)血清添加物使用。

該培養(yǎng)基中碳酸氫na含量為350mg/L，是為了與空氣里的二氧化碳起緩沖作用而存在，不足以于5%二氧化碳環(huán)境中達(dá)到平衡，而可以直接于無(wú)二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)昆蟲(chóng)細(xì)胞。為保持本產(chǎn)品的良好使用效果，請(qǐng)勿進(jìn)行凍融處理。

培養(yǎng)基主要成份表

（-）  酚   紅

（+）  700mg/L   D-葡萄糖

（+）  600mg/L   L-谷氨酰an

（+）  350mg/L   NaHCO3

PH       6.1 ---6.4

運(yùn)輸和保存

放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸（儲(chǔ)存條件2-8℃ 避光儲(chǔ)存）產(chǎn)品保質(zhì)期12個(gè)月。

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì)，請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來(lái)水沖洗即可。

以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)。

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用 Countess®自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類(lèi)。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C。或者，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。

1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞

在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀(guān)察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。

3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性

通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類(lèi)型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。

4.研究?jī)?nèi)容便于觀(guān)察、檢測(cè)和記錄

采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備  記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；

適用的對(duì)象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。

6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)

可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。