綜合微生物的培養(yǎng)方法,包括以下步驟:
(1)前期準(zhǔn)備:(A)滅菌處理;(B)制備Biolite水;(C)檢查設(shè)備和材料;
(2)按比例配制培養(yǎng)材料;
(3)導(dǎo)入曝氣,進(jìn)行繁殖培養(yǎng);
(4)取液觀察;(a)取液;(b)稀釋菌液;(c)平板培養(yǎng);
(5)分離并檢測(cè);
(6)取液儲(chǔ)存;通過(guò)該綜合微生物培養(yǎng)方法簡(jiǎn)單可操作性強(qiáng),培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以?xún)?nèi),菌類(lèi)穩(wěn)定不發(fā)生突變,且繁殖快速。
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規(guī)格參數(shù):
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
緊密枝頂孢(斜面)規(guī)格 | Acremonium | EY-J963858 |
資源名稱(chēng): 緊密枝頂孢(斜面)
種屬: Acremonium strictum
分離基物: 土壤
提供形式: 凍干物
安全等級(jí): 1
模式菌株: no
培養(yǎng)基: PDA 培養(yǎng)基 :馬鈴薯提取液 1.0 L,葡萄糖 20.0 g,瓊脂 15.0 g,自然pH。
生長(zhǎng)條件: 25-28℃,好氧
存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
低溫存法:
①簡(jiǎn)單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過(guò)1~2個(gè)月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3~4個(gè)月;②液氮超低溫保存法,將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲(chóng)、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法保存。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無(wú)機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過(guò)0.5%),碳源豐富容易造成酸性的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營(yíng)養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營(yíng)養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類(lèi)培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐,常采用母瓶、子瓶?jī)杉?jí)培養(yǎng),有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長(zhǎng)。原則上各種營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過(guò)程,因菌種不同而異,一般可分為一級(jí)種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱(chēng)為一級(jí)種子,把一級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱(chēng)為二級(jí)發(fā)酵。如果將一級(jí)種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過(guò)培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱(chēng)為二級(jí)種子,將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱(chēng)為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理,使用三級(jí)種子的發(fā)酵,稱(chēng)為四級(jí)發(fā)酵。
促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)(學(xué)發(fā)光免疫分析法)3,6’Disinapoyl sucrose純度:≥95%
促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)(學(xué)發(fā)光免疫分析法)3’ Methoxy Puerarin純度:≥99%
促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)(學(xué)發(fā)光免疫分析法)3'hydroxy Puerarin純度:≥97%
催乳素(PRL)(學(xué)發(fā)光免疫分析法)4'Demethylpodophyllotoxin純度:≥97%
單核細(xì)胞趨蛋白1(MCP1)(學(xué)發(fā)光免疫分析法)6hydroxy7methoxy2Hchromen2one 純度:97%
單核細(xì)胞趨蛋白1(MCP1)(學(xué)發(fā)光免疫分析法)8Methoxypsoralen 8甲氧基補(bǔ)骨脂素純度:≥98%
單核細(xì)胞趨蛋白1(MCP1)(學(xué)發(fā)光免疫分析法)β,βdimethylacrylshikonin純度:≥97%
FAK/PTK2 粘著斑激酶抗體 * 0.1ml 6,7Dihydroxycoumarin
PhosphoFAK/PTK2(Tyr397) 粘著斑激酶抗體 * 0.1ml Solanesol
PhosphoFAK(Tyr861) 粘著斑激酶抗體 * 0.1ml Hesperitin
PhosphoFAK(Tyr576/577) 粘著斑激酶抗體 * 0.1ml Qingyangshengenin A
PhosphoFAK(Tyr925) 粘著斑激酶抗體 * 0.1ml Qingyangshengenin B
PhosphoFAK(Tyr407) 粘著斑激酶抗體 * 0.1ml 4'Demethylepipodophyllotoxin
phosphoFAK(Tyr577) 粘著斑激酶抗體 * 0.1ml Demethoxycurcumin
phosphoFAK(Ser722) 粘著斑激酶抗體 * 0.1ml Norisoboldine
胰島素(INS)酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)酶聯(lián)免疫試劑盒 Human cTn-ⅠELISA Kit
過(guò)氧化物酶(GPX)測(cè)試盒 GR法 50管/48樣
Ratmaixmetalloproteinase5,MMP-5酶聯(lián)免疫試劑盒基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanhemoglobin-advancedglycosylationendproducts,Hb-AGE酶聯(lián)免疫試劑盒血紅蛋白晚期糖基化終末產(chǎn)物(Hb-AGE)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanlipoproteinα,Lp-αELISAKit脂蛋白α(Lp-α)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
αL巖藻糖苷酶(AFU)酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
白介素13(IL-13)酶聯(lián)免疫試劑盒 Rabbit ierleukin 13,IL-13 ELISA Kit
熱休克蛋白90(HSP-90)酶聯(lián)免疫試劑盒 ,英文名: HSP-90 ELISA Kit
PorcinevonWillebrandFactor,vWF酶聯(lián)免疫試劑盒血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanai-cardiolipinaibodyIgM,ACA-IgM酶聯(lián)免疫試劑盒抗心脂抗體IgM(ACA-IgM)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanbeta-siteAPP-cleavingenzyme2,BACE2ELISAKitβ位淀樣前體蛋白裂解酶2(BACE2)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
緊密枝頂孢(斜面)規(guī)格DDC/FITC 熒光素標(biāo)記多巴胺脫羧酶抗體IgGC2CD4D蛋白抗體2,8-二溴二苯并噻吩Rat EGR3 (Early Growth Response Protein 3) ELISA Kit
DEC-205/CD205/Ly75/FITC 熒光素標(biāo)記CD205抗體IgG二硫鍵氧化還原酶鋅指蛋白5抗體1-異辛酯Rat GLUT1 (Glucose Transporter 1) ELISA Kit
Dectin-1/CLECSF12/FITC 熒光素標(biāo)記C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族7成員A抗體IgGL-型電壓依賴(lài)型鈣通道β抗體1-異辛酯Rat GLUT2 (Glucose Transporter 2)ELISA Kit
Dectin-2/CLECSF10/CLEC6A/FITC 熒光素標(biāo)記C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族6成員A抗體IgG過(guò)氧化氫酶抗體1-異辛酯Rat AChE (Acetylcholinesterase) ELISA Kit
Dectin-1/CLECSF12/RBITC 紅色熒光素羅丹明標(biāo)記C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族7成員A抗體IgG細(xì)胞色素P450 2C19抗體3-鄰二甲苯Rat MPIF2 (Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 2) ELISA Kit
DDX4/MVH/FITC 熒光素標(biāo)記DDX4抗體IgG心肌特異性肌鈣蛋白T抗體3-鄰二甲苯Rat ELA4 (Elastase 4) ELISA Kit
Defensin Beta1/FITC 熒光素標(biāo)記防御素β1抗體IgGCD161抗體3-鄰二甲苯Rat EMILIN 1 (Elastin Microfibril Interface Located Protein 1) ELISA Kit
Defensin Beta2/beta-defensin 2/BD-2(mouse) /FITC 熒光素標(biāo)記防御素β2抗體IgG7號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框65抗體3,4-二Rat ELOA (Elongin A) ELISA Kit