綜合微生物的培養(yǎng)方法,包括以下步驟:
(1)前期準(zhǔn)備:(A)滅菌處理;(B)制備Biolite水;(C)檢查設(shè)備和材料;
(2)按比例配制培養(yǎng)材料;
(3)導(dǎo)入曝氣,進(jìn)行繁殖培養(yǎng);
(4)取液觀察;(a)取液;(b)稀釋菌液;(c)平板培養(yǎng);
(5)分離并檢測(cè);
(6)取液儲(chǔ)存;通過(guò)該綜合微生物培養(yǎng)方法簡(jiǎn)單可操作性強(qiáng),培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以內(nèi),菌類(lèi)穩(wěn)定不發(fā)生突變,且繁殖快速。
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規(guī)格參數(shù):
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
肺炎克雷伯氏菌 | Klebsiella | EY-J963459 |
資源名稱(chēng): 肺炎克雷伯氏菌
種屬: Klebsiella pneumoniae
分離基物: 番茄醬
提供形式: 凍干粉
安全等級(jí): 2
模式菌株: no
應(yīng)用領(lǐng)域: 研究、質(zhì)量控制
培養(yǎng)基: NB
生長(zhǎng)條件: 37℃,好氧,18h
存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
低溫存法:
①簡(jiǎn)單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過(guò)1~2個(gè)月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3~4個(gè)月;②液氮超低溫保存法,將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲(chóng)、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法保存。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無(wú)機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過(guò)0.5%),碳源豐富容易造成酸性的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營(yíng)養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營(yíng)養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類(lèi)培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐,常采用母瓶、子瓶?jī)杉?jí)培養(yǎng),有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長(zhǎng)。原則上各種營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過(guò)程,因菌種不同而異,一般可分為一級(jí)種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱(chēng)為一級(jí)種子,把一級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱(chēng)為二級(jí)發(fā)酵。如果將一級(jí)種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過(guò)培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱(chēng)為二級(jí)種子,將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱(chēng)為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理,使用三級(jí)種子的發(fā)酵,稱(chēng)為四級(jí)發(fā)酵。
Aodiella│zonata (Berk.) Ryvarden 中文名稱(chēng):環(huán)帶薄孔菌Aodiella│zonata (Berk.) Ryvarden分離基物:子實(shí)體提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:25存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:99.9% trace metals basis
Bondarzewia│berkeleyi (Fr.) Bondartsev & Singer 中文名稱(chēng):伯克利邦氏孔菌Bondarzewia│berkeleyi (Fr.) Bondartsev & Singer分離基物:子實(shí)體提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:25存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:99.9% trace metals basis
Ceriporia│spissa (Schwein. ex Fr.) Rajchenb. 中文名稱(chēng):緊密蠟孔菌Ceriporia│spissa (Schwein. ex Fr.) Rajchenb.分離基物:子實(shí)體提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:25存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:Pt 34%
Coltricia│cinnamomea (Jacq.) Murrill 中文名稱(chēng):肉桂色集毛孔菌Coltricia│cinnamomea (Jacq.) Murrill分離基物:子實(shí)體提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:25存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:Pt 34%
Funalia│polyzona (Pers.) Niemelä 中文名稱(chēng):多帶革孔菌Funalia│polyzona (Pers.) Niemelä分離基物:子實(shí)體提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:25存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:
Daedaleopsis│sinensis (Lloyd) Y. C. Dai 中文名稱(chēng):中國(guó)擬迷孔菌Daedaleopsis│sinensis (Lloyd) Y. C. Dai分離基物:子實(shí)體提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:25存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:AR,99%
Fomes│fomentarius (L.) J. Kickx f. 中文名稱(chēng):木蹄層孔菌Fomes│fomentarius (L.) J. Kickx f.提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:25存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:AR,99%
Aodia│macrospora Bernicchia & De Domincis 中文名稱(chēng):大孢薄孔菌Aodia│macrospora Bernicchia & De Domincis分離基物:子實(shí)體提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:25存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:97%
肺炎克雷伯氏菌DRD3 多巴胺受體D3抗體異鼠李素3-基二甲氧基硅烷Human CASP10 (Caspase 10) ELISA Kit
DAT1 多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體山柰酚(山柰素)3-基二甲氧基硅烷Human CASP11 (Caspase 11) ELISA Kit
DRD4 多巴胺受體D4抗體銀杏內(nèi)酯A環(huán)匹阿尼Human CASP12 (Caspase 12) ELISA Kit
DRD5/Dopamine Receptor D5 多巴胺受體D5抗體銀杏內(nèi)酯B溴螨酯Human CASP14 (Caspase 14) ELISA Kit
DBC1 膀胱癌缺失基因1銀杏內(nèi)酯C(暫行)二肉豆蔻酰磷脂酰膽(DMPC)Human CASP8 (Caspase 8) ELISA Kit
Phospho-DBC1 (Thr454) 磷化膀胱癌缺失基因1白果內(nèi)酯二肉豆蔻酰磷脂酰膽(DMPC)Human CASP4 (Caspase 4) ELISA Kit
DBH 多巴胺β羥化酶抗體銀杏葉對(duì)照提取物二肉豆蔻酰磷脂酰膽(DMPC)Human CASP7 (Caspase 7) ELISA Kit
DCC 結(jié)腸直腸癌缺失基因抗體丹參 INα-Fmoc-L-2,3-二氨基Human CAD (Caspase Activated Deoxyribonuclease) ELISA Kit