綜合微生物的培養(yǎng)方法,包括以下步驟:
(1)前期準(zhǔn)備:(A)滅菌處理;(B)制備Biolite水;(C)檢查設(shè)備和材料;
(2)按比例配制培養(yǎng)材料;
(3)導(dǎo)入曝氣,進(jìn)行繁殖培養(yǎng);
(4)取液觀(guān)察;(a)取液;(b)稀釋菌液;(c)平板培養(yǎng);
(5)分離并檢測(cè);
(6)取液儲(chǔ)存;通過(guò)該綜合微生物培養(yǎng)方法簡(jiǎn)單可操作性強(qiáng),培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以?xún)?nèi),菌類(lèi)穩(wěn)定不發(fā)生突變,且繁殖快速。
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規(guī)格參數(shù):
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
野油菜黃單胞菌規(guī)格 | Xanthomona | EY-J963478 |
資源名稱(chēng): 野油菜黃單胞菌
種屬: Xanthomonas campestris
提供形式: 凍干物
安全等級(jí): 1
模式菌株: no
應(yīng)用領(lǐng)域: 黃原膠菌。
培養(yǎng)基: 營(yíng)養(yǎng)肉汁瓊脂:蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 20.0g,蒸餾水 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。
生長(zhǎng)條件: 30℃,好氧
存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
低溫存法:
①簡(jiǎn)單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過(guò)1~2個(gè)月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3~4個(gè)月;②液氮超低溫保存法,將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線(xiàn)菌、酵母和原蟲(chóng)、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法保存。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 放線(xiàn)菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無(wú)機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過(guò)0.5%),碳源豐富容易造成酸性的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境,不利于放線(xiàn)菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營(yíng)養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線(xiàn)菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營(yíng)養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類(lèi)培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐,常采用母瓶、子瓶?jī)杉?jí)培養(yǎng),有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長(zhǎng)。原則上各種營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過(guò)程,因菌種不同而異,一般可分為一級(jí)種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱(chēng)為一級(jí)種子,把一級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱(chēng)為二級(jí)發(fā)酵。如果將一級(jí)種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過(guò)培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱(chēng)為二級(jí)種子,將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱(chēng)為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理,使用三級(jí)種子的發(fā)酵,稱(chēng)為四級(jí)發(fā)酵。
Dictyophora│indusiata 中文名稱(chēng):長(zhǎng)裙竹蓀Dictyophora│indusiata提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:25℃ 純度:熒光級(jí)
Pleurotus│citrinopileatus 中文名稱(chēng):金頂側(cè)耳(榆黃蘑)Pleurotus│citrinopileatus提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:25℃ 純度:98%
Dictyophora│duplica 中文名稱(chēng):短裙竹蓀Dictyophora│duplica提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:食用培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;礦物油法;定期移植法 純度:98%
Trames│versicolor 中文名稱(chēng):云芝栓孔菌(云芝)Trames│versicolor提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:藥用培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:25℃ 純度:98%
Morehella│esculenta 中文名稱(chēng):羊肚菌Morehella│esculenta提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:25℃ 純度:98%
Favolus│squamosus 中文名稱(chēng):寬鱗大孔菌Favolus│squamosus提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:25℃ 純度:98%
Coprinus│comatus 中文名稱(chēng):雞腿菇(毛頭鬼傘)Coprinus│comatus提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:25℃ 純度:98%
Morchella│elata 中文名稱(chēng):高羊肚菌Morchella│elata提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:25℃ 純度:98%
野油菜黃單胞菌規(guī)格Phospho-EphA2 (Tyr594) 磷化酪氨蛋白激酶A2受體抗體苯甲1-溴-2--4-Human NPYR5 (Neuropeptide Y Receptor Y5) ELISA Kit
EphA4 R 酪氨蛋白激酶A4受體抗體卡維丁1-溴-2--4-Human ConA (Concanavalin A) ELISA Kit
EphB2 R EphB2 R抗體氧化槐果FMOC-L-3-(2-吡基)-氨Human CTGF (Connective Tissue Growth Factor) ELISA Kit
EPOR 紅細(xì)胞生成素受體抗體白鮮FMOC-L-3-(2-吡基)-氨Human CTAPIII (Connective Tissue Activating Peptide III) ELISA Kit
EphB6 酪氨蛋白激酶受體B6抗體5-羥色胺鹽鹽2-(甲基硫代)乙胺Human CX26 (Connexin 26) ELISA Kit
ER-alpha 雌激素受體α抗體烈香杜鵑油2-(甲基硫代)乙胺Human CX31 (Connexin 31) ELISA Kit
ERAB 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Aβ相關(guān)結(jié)合蛋白抗體沙丁胺Human CHGB (Chromogranin B) ELISA Kit
ERCC1 DNA切除修復(fù)蛋白1抗體脯氨4,4',4''-三[2-萘基苯基氨基]三苯基胺Human DEFα1 (Defensin Alpha 1, Neutrophil) ELISA Kit