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資源名稱: 甲基營(yíng)養(yǎng)型芽胞桿菌

種屬: Bacillus methylotrophicus

分離基物: 植物根際土壤

提供形式: 凍干物

安全等級(jí): 1

模式菌株: no

應(yīng)用領(lǐng)域: 具促生作用，對(duì)真菌病害有拮抗作用。利用HPLC對(duì)其發(fā)酵初提液進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)該菌株可產(chǎn)生表面活性素和伊枯草菌素?？捎糜谖⑸锝虒W(xué)研究，也可用于微生物農(nóng)藥的研究和制備。

培養(yǎng)基: 營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，18-24h。營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基： 3.0g，蛋白胨 10.0g，NaCl 5.0g，瓊脂 20.0g（液體培養(yǎng)基不含），蒸餾水 1.0L，pH7.0。121℃，15min。

生長(zhǎng)條件: 28℃;好氧

存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法
規(guī)格參數(shù)：

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低溫存法:
①簡(jiǎn)單保存法，將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過(guò)1～2個(gè)月，若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3～4個(gè)月；②液氮超低溫保存法，將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中，密封于安瓿管內(nèi)，然后控制冷卻速度，使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí)，即可置于-150～-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物，都可用此法保存。
微生物菌種的培養(yǎng)：
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養(yǎng)成分，如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無(wú)機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1％，氮源不超過(guò)0.5％)，碳源豐富容易造成酸性的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境，不利于放線菌孢子的形成，氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下，干燥和限制營(yíng)養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃，少數(shù)為37 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為5～14天。
⑵ 霉菌孢子的制備　
霉菌的孢子培養(yǎng)，一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營(yíng)養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖，而且這類培養(yǎng)基的表面積較大，可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25～28 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為4～14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備　
搖瓶種子進(jìn)罐，常采用母瓶、子瓶?jī)杉?jí)培養(yǎng)，有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*，并易被菌體分解利用，氮源豐富有利于菌絲生長(zhǎng)。原則上各種營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)濃，子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高，更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備　
種子罐種子制備的工藝過(guò)程，因菌種不同而異，一般可分為一級(jí)種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中，經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲，這樣的種子稱為一級(jí)種子，把一級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為二級(jí)發(fā)酵。如果將一級(jí)種子接入體積較大的種子罐內(nèi)，經(jīng)過(guò)培養(yǎng)形成更多的菌絲，這樣制備的種子稱為二級(jí)種子，將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理，使用三級(jí)種子的發(fā)酵，稱為四級(jí)發(fā)酵。
綜合微生物的培養(yǎng)方法，包括以下步驟：
（1）前期準(zhǔn)備：（A）滅菌處理；（B）制備Biolite水；（C）檢查設(shè)備和材料；
（2）按比例配制培養(yǎng)材料；
（3）導(dǎo)入曝氣，進(jìn)行繁殖培養(yǎng)；
（4）取液觀察；（a）取液；（b）稀釋菌液；（c）平板培養(yǎng)；
（5）分離并檢測(cè)；
（6）取液儲(chǔ)存；通過(guò)該綜合微生物培養(yǎng)方法簡(jiǎn)單可操作性強(qiáng)，培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以內(nèi)，菌類穩(wěn)定不發(fā)生突變，且繁殖快速。
Aspergillus│niger 中文名稱：黑曲霉Aspergillus│niger提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:中國(guó)藥典質(zhì)控菌株。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0014生長(zhǎng)條件:25-28℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法；定期移植法 純度：99%

Aspergillus oryzae 中文名稱：米曲霉Aspergillus oryzae提供形式:斜面培養(yǎng)物/凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:研究；。醬油試驗(yàn)。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:5 °Bé麥芽汁瓊脂：5°Bé麥芽汁 1.0L，瓊脂 15.0g，自然pH。生長(zhǎng)條件:28℃，好氧。生長(zhǎng)特性菌落質(zhì)地疏松，起初白色或黃色，即變?yōu)辄S褐色至淡綠褐色。反面無(wú)色。分生孢子穗放射形；分生孢子梗壁很薄，粗糙；頂囊近球形或燒瓶形；分生孢子幼時(shí)洋梨形或橢圓形，老后大多變?yōu)榍蛐位蚪蛐?，粗糙或近于光滑。能產(chǎn)生大量的曲，蛋白質(zhì)分解力強(qiáng)。存儲(chǔ)條件:2-8℃。真空冷凍干燥法 純度：98%

Aspergillus tubingensis 中文名稱：塔賓曲霉Aspergillus tubingensis提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:產(chǎn)半纖維素酶。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:查氏瓊脂(Czapek's Agar)：蔗糖 30.0g，NaNO3 3.0g，MgSO4·7H2O 0.5g，KCl 0.5g，F(xiàn)eSO4·4H2O 0.01g，K2HPO4 1.0g，瓊脂 15.0g，蒸餾 1.0L，pH6.0～6.5。生長(zhǎng)條件:25～28℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度：AR,99.5%

Aspergillus│usamii 中文名稱：宇佐美曲霉Aspergillus│usamii提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:以橡子為原料酒精。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0015生長(zhǎng)條件:28-30℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度：AR,99.5%

Botrytissp. 中文名稱：葡萄孢Botrytissp.安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:病原菌。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:15生長(zhǎng)條件:25-28℃ 純度：Pd ≥26.3%

Metarhiziumanisopliaevar.anisopliae 中文名稱：金龜子綠僵菌孢變種Metarhiziumanisopliaevar.anisopliae安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:生物防治培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:25-28℃ 純度：99.99% trace metals basis

Beauveria│bassiana 中文名稱：球孢白僵菌Beauveria│bassiana提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:昆蟲防治。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0014生長(zhǎng)條件:25-28℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度：94%

Metarhizium pingshaense Chenet Guo(1986) 中文名稱：平沙綠僵菌Metarhizium pingshaense Chenet Guo(1986)提供形式:凍干安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:防治鞘翅目、同翅目的幼蟲及成蟲。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA：馬鈴薯煮汁1000mL，磷二氫鉀 3g，鎂 1.5g，葡萄糖 20g，1 10mg，瓊脂 20g，pH自然。馬鈴薯煮液：200g馬鈴薯，去皮，切塊，放入蒸餾中煮沸30min，取濾液定容至1000mL,備用。121℃，15min。生長(zhǎng)條件:24-28℃，好氧。 純度：94%
甲基營(yíng)養(yǎng)型芽胞桿菌示蛋白胨（Proteose Peptone）苦參2-(羥甲基)-1-甲叔丁酯MYOZ/MYOZ1(Myozenin)human、ret、mouse  MYOZ抗原

谷氨鈉 (LP0124)氧化苦參（）2-(羥甲基)-1-甲叔丁酯CHRNA7(Nicotinic-Acetylcholine receptor alpha 7)  煙型乙酰膽受體α7(多肽)

一號(hào)植物蛋白胨 Vegetable Peptone 咖啡2-(羥甲基)-1-甲叔丁酯Nanog fragment  干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白(多肽)

植物蛋白胨肉湯 Vegetable Peptone Broth硫辛2,4-二甲Natrexone/BSA:Natrexone/KLH  納曲偶聯(lián)牛血清白蛋白：納曲偶聯(lián)血藍(lán)蛋白

植物蛋白胨磷鹽肉湯 (VG0200)鹽氨基葡萄糖2,4-二甲NAP1 (nucleosome assembly protein 1)  核體組裝蛋白1（多肽）

非轉(zhuǎn)基因大豆蛋白胨（GMO-Free Soya Peptone）3,4-Difluoro-2-Methylbenzoic AcidN-cadherin  N-鈣粘附分子抗原

Nutrient Agar 營(yíng)養(yǎng)瓊脂落新婦苷3,4-Difluoro-2-Methylbenzoic AcidE-cadherin  E-鈣粘附分子抗原

Nutrient Agar Tablets 營(yíng)養(yǎng)瓊脂片劑蘆丁1-叔丁氧羰基-4-乙Nephrin Protein