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產(chǎn)品名稱 | 肺腺癌細胞；NCI-H2009 |
生長特性 | 貼壁生長 |
貨號 | EY-X63855 |
細胞名稱 肺腺癌細胞；NCI-H2009
形態(tài)特性: 上皮細胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細胞1983年建系，源自68歲肺腺癌女性患者的轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)。
培養(yǎng)條件: DMEM/F12(1:1):Ham'sF12/DMEMedium(DMEH-16/F-1250%Mixturew/oHEPES,withNEAAMedium)5%FBS；0.005mg/mlInsulin+0.01mg/mlTransferrin+30nMSodiumselenite+10nMHydrocortisone+10nMbeta-estradiol+extra2mML-glutamine
傳代方法:
傳代情況: P25
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 培養(yǎng)法（-）
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產(chǎn)品特點:
1、 使用方便:不需昂貴設備。
2、 可以處理各種細菌菌體，包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。
4、 采用溫和的中性裂解組分，保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩(wěn)定劑，提取的蛋白穩(wěn)定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時，背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑；每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性，包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA，與金屬螯和層析等兼容。
培養(yǎng)操作步驟 ：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù)，按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生的細胞，以0.25％消化成單細胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ，計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生的細胞用消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。
類固醇17α羥化酶檢測試劑盒
PPM1M ELISA Kit
人肺巨癌高轉(zhuǎn)移系拉丁屬名: Tolypocladium inflatum聚（甲基乙烯基共聚馬來酸）Human CYP1A1(Cytochrome P450 1A1) ELISA Kit
人白血病系拉丁屬名: Byssochlamys fulva聚（甲基乙烯基共聚馬來酸）Human PPP1CB ELISA Kit
小鼠白血病克隆系注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用環(huán)丁基Human PPFIBP2 ELISA Kit
雜交瘤抗CD2用途: 代謝產(chǎn)物具有抗菌活性。環(huán)丁基Human CYB5A(Cytochrome b5) ELISA Kit
人急性B淋巴白血病注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用環(huán)丁基Human PPARGC1B ELISA Kit
人正常宮頸上皮注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用二異Human PPIL6 ELISA Kit
人肝內(nèi)膽管癌拉丁屬名: Saccharomyces cervisiae Hansen var. ellipsoideus (Hansen) Dekker二異Human PPAT ELISA Kit
人喉鱗癌拉丁屬名: Halorubrum vacuolatum二異Human PPM1A ELISA Kit
大鼠腦靜脈內(nèi)皮拉丁屬名: Aspergillus niger3-甲氧基丁Human PPCS ELISA Kit
人視網(wǎng)膜母瘤拉丁屬名: coli3-甲氧基丁Human PPEF1 ELISA Kit
小鼠癌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用聚四Human PPM1B ELISA Kit
人食管腺癌用途: 用作生物防治研究2.6-二氯-4-硝基吡啶Human PPM1F ELISA Kit
人急性單核白血病注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用羥基乙叉二膦酸 一水合物 （HEDP）Human PPP1CB ELISA Kit
小鼠臍靜脈內(nèi)皮注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用羥基乙叉二膦酸 一水合物 （HEDP）Human PPM1G ELISA Kit
鴨子胚胎成纖維拉丁屬名: Rhizobium leguminosarum羥基乙叉二膦酸 一水合物 （HEDP
肺腺癌細胞；NCI-H20091-咖啡酰奎寧1241-87-8英文名：Cyclohexanecarboxylicacid
英文別名：1-[[3-(3,4-dihydroxyphenyl)-1-oxo-2-propen-1-yl]oxy]-3,4,5-trihydroxy-,(1a,3R,4a,5R)
CAS登錄號：1241-87-8
分子式：C16H18O9
分子量：354.31
分子結(jié)構(gòu)：
外觀：淡黃色固體
規(guī)格：20 mg/支
純度：≥ 98%
用途：用于含量測定/鑒定/藥理實驗等。
提取來源：忍冬科植物金銀花Lonicera Japonica
溶解性：溶于、、乙醇，不溶于。
熔點：234.5 °C
藥理藥效：消炎、抗病作用。
貯存條件： 4℃冷藏、密封、避光
有效期： 2年
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