綜合微生物的培養(yǎng)方法,包括以下步驟:
(1)前期準(zhǔn)備:(A)滅菌處理;(B)制備Biolite水;(C)檢查設(shè)備和材料;
(2)按比例配制培養(yǎng)材料;
(3)導(dǎo)入曝氣,進(jìn)行繁殖培養(yǎng);
(4)取液觀察;(a)取液;(b)稀釋菌液;(c)平板培養(yǎng);
(5)分離并檢測(cè);
(6)取液儲(chǔ)存;通過(guò)該綜合微生物培養(yǎng)方法簡(jiǎn)單可操作性強(qiáng),培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以內(nèi),菌類(lèi)穩(wěn)定不發(fā)生突變,且繁殖快速。
?
規(guī)格參數(shù):
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
鞘氨醇桿菌屬規(guī)格 | Sphingobac | EY-J963346 |
資源名稱(chēng): 鞘氨醇桿菌屬
種屬: Sphingobacterium sp.
分離基物: 原料乳
提供形式: 凍干物
安全等級(jí): 1
模式菌株: no
應(yīng)用領(lǐng)域: 可導(dǎo)致乳品蛋白變性
培養(yǎng)基: 哥倫比亞血平板
生長(zhǎng)條件: 30℃,好氧24h,鏡檢為陰性桿菌,菌種純。
存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
低溫存法:
①簡(jiǎn)單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過(guò)1~2個(gè)月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3~4個(gè)月;②液氮超低溫保存法,將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲(chóng)、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法保存。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無(wú)機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過(guò)0.5%),碳源豐富容易造成酸性的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營(yíng)養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營(yíng)養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類(lèi)培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐,常采用母瓶、子瓶?jī)杉?jí)培養(yǎng),有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長(zhǎng)。原則上各種營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過(guò)程,因菌種不同而異,一般可分為一級(jí)種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱(chēng)為一級(jí)種子,把一級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱(chēng)為二級(jí)發(fā)酵。如果將一級(jí)種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過(guò)培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱(chēng)為二級(jí)種子,將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱(chēng)為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理,使用三級(jí)種子的發(fā)酵,稱(chēng)為四級(jí)發(fā)酵。
Penicillium islandicum 中文名稱(chēng):島青霉Penicillium islandicum提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA:馬鈴薯煮汁1000mL,磷二氫鉀 3g,鎂 1.5g,葡萄糖 20g,1 10mg,瓊脂 20g,pH自然。馬鈴薯煮液:200g馬鈴薯,去皮,切塊,放入蒸餾中煮沸30min,取濾液定容至1000mL,備用。121℃,15min。生長(zhǎng)條件:25℃,好氧存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度:98%
Penicillium cyclopiumWestling=Penicillium aurantiogriseum 中文名稱(chēng):園弧青霉=桔灰青霉Penicillium cyclopiumWestling=Penicillium aurantiogriseum提供形式:凍干安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:降解DNA培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA:馬鈴薯煮汁1000mL,磷二氫鉀 3g,鎂 1.5g,葡萄糖 20g,1 10mg,瓊脂 20g,pH自然。馬鈴薯煮液:200g馬鈴薯,去皮,切塊,放入蒸餾中煮沸30min,取濾液定容至1000mL,備用。121℃,15min。生長(zhǎng)條件:28-30℃,好氧 純度:98%
PenicilliumcorylophilumDierckx 中文名稱(chēng):頂青霉PenicilliumcorylophilumDierckx安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:產(chǎn)磷二脂酶培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:15生長(zhǎng)條件:25-26℃ 純度:96%
Penicillium citreo-viride 中文名稱(chēng):黃綠青霉Penicillium citreo-viride提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA:20%馬鈴薯汁1L,葡萄糖20g ,KH2PO4 3g, MgSO4.7H2O 1.5g,硫胺素微量,瓊脂 15g,pH 自然。生長(zhǎng)條件:25-28℃,好氧存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度:96%
Penicillium chrysogenum Thom 中文名稱(chēng):產(chǎn)黃青霉Penicillium chrysogenum Thom提供形式:凍干/斜面安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:察氏瓊脂:Sucrose (蔗糖) 30g NaNO3 3g MgSO4.7H2O 0.5g KCl 0.5g FeSO4.7H2O 0.01g K2HPO4 1g Agar (瓊脂) 13g Distilled war (蒸餾) 1000ml pH 7.2生長(zhǎng)條件:25-26℃,好氧存儲(chǔ)條件:2-8℃ 純度:96%
PenicilliumadametziZaleski 中文名稱(chēng):阿達(dá)青霉PenicilliumadametziZaleski安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:從望遠(yuǎn)鏡分離,光學(xué)儀器防霉試驗(yàn)菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:15生長(zhǎng)條件:25-26℃ 純度:≥99%
Paecilomycesheliothis(Charles)BrownetSmith 中文名稱(chēng):棉鈴蟲(chóng)擬青霉Paecilomycesheliothis(Charles)BrownetSmith安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:生物防治培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14,17生長(zhǎng)條件:25-26℃ 純度:97%,順式和反式混合物
Paecilomycesfumosa-roseus(Wize)BrownetSmith 中文名稱(chēng):玫煙色擬青霉Paecilomycesfumosa-roseus(Wize)BrownetSmith安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:生物防治培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14,17生長(zhǎng)條件:25-28℃ 純度:97%,順式和反式混合物
鞘氨醇桿菌屬規(guī)格Dermasel 瓊脂 (CM0539)脫氧野尻霉素(DNJ)單硝異山梨酯S100B S100B蛋白抗原
沙保氏麥芽糖瓊脂 (CM0041a)劍麻皂苷元苯基三乙基S100B(S100 calcium binding protein B)(human, mouse, rat, bovine, Rabbit, chicken) S100B蛋白多肽
產(chǎn)氣莢膜菌瓊脂基礎(chǔ) (OPSP) (CM0543)檸檬苦素苯基三乙基S-100A1 (S100 calcium-binding protein A1) 鈣結(jié)合蛋白S100A1抗原
葡萄糖酵母提取物選擇性培養(yǎng)基(OGYE培養(yǎng)基) (CM0545)諾米林4--2-苯SATB1(special AT-rich sequence binding protein) 核基質(zhì)結(jié)合區(qū)結(jié)合蛋白1抗原
虎瓊脂基礎(chǔ) (CM0549)4--2-苯SCF (Stem Cell Factor) 干細(xì)胞生長(zhǎng)因子抗原
假單胞菌瓊脂基礎(chǔ) (CM0559)羅漢果皂甙V5-吲哚SCN9A/NAV1.7(Sodium channel protein type 9 subunit alpha) 電壓開(kāi)啟的鈉離子通道SCN9A抗原
十六烷基瓊脂 (CM0579)安石榴甙1,2-二(三乙氧硅烷基)乙烷CXCL14(CXC-chemokine ligand 16) CXC趨化因子14抗原
產(chǎn)氣莢膜菌瓊脂基礎(chǔ) (TSC/SFP) (CM0587)獐牙菜苦苷1,2-二(三乙氧硅烷基)乙烷CXCL16 peptide CXC趨化因子16抗原