綜合微生物的培養(yǎng)方法,包括以下步驟:
(1)前期準備:(A)滅菌處理;(B)制備Biolite水;(C)檢查設(shè)備和材料;
(2)按比例配制培養(yǎng)材料;
(3)導入曝氣,進行繁殖培養(yǎng);
(4)取液觀察;(a)取液;(b)稀釋菌液;(c)平板培養(yǎng);
(5)分離并檢測;
(6)取液儲存;通過該綜合微生物培養(yǎng)方法簡單可操作性強,培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以內(nèi),菌類穩(wěn)定不發(fā)生突變,且繁殖快速。
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規(guī)格參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
可可毛色二孢菌(斜面)規(guī)格 | Lasiodiplo | EY-J964074 |
資源名稱: 可可毛色二孢菌(斜面)
種屬: Lasiodiplodia theobromae (Pat.) Griffon & Maubl.
分離基物: 玉蕊根
提供形式: 斜面培養(yǎng)物
安全等級: 1
模式菌株: no
應(yīng)用領(lǐng)域: 藥用植物內(nèi)生菌
培養(yǎng)基: 綜合PDA:馬鈴薯煮汁1000mL,二氫鉀二氫鉀 3g,鎂 1.5g,葡萄糖 20g,1 10mg,瓊脂 20g,pH自然。馬鈴薯煮液:200g馬鈴薯,去皮,切塊,放入蒸餾水中煮沸30min,取濾液定容至1000mL,備用。121℃,15min。
生長條件: 25~28℃,好氧
存儲條件: 定期移植法
低溫存法:
①簡單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時間不超過1~2個月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達3~4個月;②液氮超低溫保存法,將生長穩(wěn)定期的細胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法保存。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng),有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級種子,把一級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為二級發(fā)酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為三級發(fā)酵。同樣道理,使用三級種子的發(fā)酵,稱為四級發(fā)酵。
FGF5 纖維母細胞生長因子5抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Eriodictyol
FGF6 纖維母細胞生長因子6抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Dendrobine
KCNK TWIK相關(guān)敏感離子通道蛋白9抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Punicalin
KDM4C/GASC1/JMJD2C 鱗狀細胞癌增強蛋白1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml (−)Huperzine A
KGF/FGF7 纖維母細胞生長因子7抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Cyanidin3Oglucoside chloride
FGF8/HBGF8 成纖維細胞生長因子8抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Carthamine;Safflower Yellow
KLHL7 kelch樣蛋白7抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml L(+)Rhamnose monohydrate
FGF10 成纖維細胞生長因子10抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml L(+)Rhamnose monohydrate
Lgalactono1,4lactone Dehydrogenase英文簡稱GLDH死亡效應(yīng)結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體 檢測范圍:3205nmol/L48U/L
Aldonic acid lipoproteinlipase英文簡稱AAL細胞周期及凋亡調(diào)節(jié)蛋白1抗體 檢測范圍:3206nmol/L160U/L
starch synthase英文簡稱SSS死亡相關(guān)蛋白1抗體 檢測范圍:3207nmol/L80U/L
Glycine decarboxylase英文簡稱GDC細胞質(zhì)分裂付出蛋白1抗體 檢測范圍:3208nmol/L48U/L
Serine Glyoxylate Aminotransferase英文簡稱SGADEK癌基因結(jié)合蛋白 檢測范圍:3209nmol/L80U/L
glycine betaine英文簡稱GB腦發(fā)育調(diào)節(jié)蛋白抗體 檢測范圍:3210nmol/L8ng/mL
reduced nicotinamide adenine dinucleotide phosphate英文簡稱NADPHCaspase 激活的脫氧核糖核酶抗體 檢測范圍:3211nmol/L4ng/mL
nicotinamide adenine dinucleotide英文簡稱NAD凋亡相關(guān)蛋白激酶1抗體 檢測范圍:3212nmol/L4ng/mL
GGP英文簡稱GGP凋亡相關(guān)蛋白激酶2抗體 檢測范圍:3213nmol/L240U/L
glucose pyrophosphorylase英文簡稱AGPase凋亡相關(guān)蛋白激酶3抗體 檢測范圍:3214nmol/L400U/L
Flavonolsynthase英文簡稱FLS交聯(lián)纖維蛋白二聚體抗體 檢測范圍:3215nmol/L120U/L
Prx英文簡稱Prx多巴轉(zhuǎn)運蛋白DAT抗體 檢測范圍:3216nmol/L120ng/mL
NADPMDH英文簡稱NADPMDH核心蛋白聚糖抗體 檢測范圍:3217nmol/L80U/L
Glyceraldehyde phosphate dehydrogenase英文簡稱GAPDH多巴受體D3抗體 檢測范圍:3218nmol/L64U/L
Choline monooxygenase英文簡稱CMO誘捕受體3抗體 檢測范圍:3219nmol/L120U/L
脂氧素A4(LXA4)酶聯(lián)免疫試劑盒 ,英文名: LXA4 ELISA Kit
乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白抗體IgG(LF/LTFAb-Ig)ELISA檢測試劑盒HumanLactoferrinaibodyIgG,LF/LTFAb-IgGELISAkit 96T/48T
丙二單酰輔酶A(malonyl CoA)酶聯(lián)免疫試劑盒 Rat malonyl coenzyme A ELISA kit
CLIAKitfoIMP-4(Humaissueinhibitorsofmetalloproteinase4)ELISAKit基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4規(guī)格:48T/96T
全組織免疫組織化學HRP酶聯(lián)DAB基礎(chǔ)檢測試劑盒(無一抗和二抗)50次
ELISAKitAT-Ⅲ抗Ⅲ抗體規(guī)格:48T/96T
犬內(nèi)皮型一合成酶(eNOS)酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
山羊促生長激素釋放激素(GHRH)酶聯(lián)免疫試劑盒 Goat growth hormone releasing hormone,GHRH ELISA Kit
囊蟲病抗體(CYT Ab)酶聯(lián)免疫試劑盒 ,英文名: CYT Ab ELISA Kit
Rat8-isoprostaglandin,8-iso-PG酶聯(lián)免疫試劑盒8異前列(8-iso-PG)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humancalnexin,CNX酶聯(lián)免疫試劑盒鈣聯(lián)蛋白(CNX)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humancytotoxin,CTXELISAKit細胞素(CTX)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
可可毛色二孢菌(斜面)規(guī)格8號染色體開放閱讀框42抗體2-乙酰氧基異丁酰溴Porcine MIP-3β/ELC/CCL19 (Macrophage Inflammatory Protein 3β) ELISA Kit
8號染色體開放閱讀框44抗體2-乙酰氧基異丁酰溴Porcine ACE (Angiotensin I Converting Enzyme) ELISA Kit
20號染色體開放閱讀框20抗體烯基二二甲酯Porcine HLA-A (Leukocyte Antigen A) ELISA Kit
4號染色體開放閱讀框46抗體雙-D-半乳糖Porcine CYTH1 (Cytohesin 1) ELISA Kit
4號染色體開放閱讀框51抗體雙-D-半乳糖Porcine INSR (Insulin Receptor) ELISA Kit
分支酶GBE1抗體2.6-二-4-甲氧基苯Porcine GP39 (Glycoprotein 39, Cartilage) ELISA Kit
磷化絲切蛋白抗體2.6-二-4-甲氧基苯Porcine OSMR (Oncostatin M Receptor) ELISA Kit
補體成分5受體1抗體(S,S)-(-)-雙(α-甲芐基)胺鹽鹽Porcine RND1 (Rho Family GTPase 1) ELISA Kit