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胱抑素CElisa試劑盒操作過程辦法

點擊次數(shù):886次 更新時間:2018-03-30

辦法一 胱抑素CElisa試劑盒用于檢查不知道抗原的雙抗體夾心法:
1. 包被:用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反響孔中加0.1ml,4℃**。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗刷緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗刷,下同)。
2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反響孔中,置37℃孵育1小時。然后洗刷。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3. 加酶標抗體:于各反響孔中,參加新鮮稀釋的酶標抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時,洗刷。
4. 加底物液顯色:于各反響孔中參加暫時的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。
5. 停止反響:于各反響孔中參加2M硫酸0.05ml。
6. 成果判定:可于白色布景上,直接用肉眼觀察成果:反響孔內(nèi)色彩越深,陽性程度越強,陰性反響為無色或極淺,根據(jù)所呈色彩的深淺,以“+”、“-”號表明。也可測O·D值:在ELISA檢查儀上,胱抑素CElisa試劑盒于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔O·D值,若大于規(guī)則的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
2g    Calcium Stearate (AS)    1592-23-0    硬脂酸鈣標準品
2g    Bismuth Subgallate (AS)    99-26-3    堿式?jīng)]食子酸鉍標準品
2g    Ascorbyl Palmitate (AS)    137-66-6    棕櫚酸酯標準品
2g    Ammonium Carbonate (AS)    8000-73-5    碳酸銨標準品
2g    Acetazolamide    59-66-5    標準品
2g        126-07-8     滲透直徑測定用標準品
2g        6381-59-5     酒石酸鉀鈉標準品
2mg            戈舍瑞林雜質(zhì)標準品
2ml    Methyl Salicylate (AS)    119-36-8     標準品
2ml    Glycerin     56-81-5     甘油標準品
2ml    Bis(2-ethylhexyl)maleate    142-16-5    馬來酸二乙基己酯標準品
2ml    Anethole (AS)    4180-23-8    茴香腦標準品
2ml            鯡魚油標準品
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