錦鯉皰疹病毒(KHV)核酸檢測試劑盒使用注意事項
錦鯉皰疹病毒(KHV)核酸檢測試劑盒(恒溫熒光法)注意事項:
1、使用本試劑前請仔細閱讀本說明書全文。
2 、操作時應(yīng)盡量少說話,因口腔中也含有支原體,可能引起樣品污染,而造成假陽性;整個檢測過程中,反應(yīng)體系的配制、樣本處理及加樣、PCR擴增應(yīng)分區(qū)域進行,以避免交叉污染。
3 、實驗時,試劑盒組分中的試劑使用前應(yīng)充分融化并混勻(混勻時禁止激烈振蕩,只需要進行上下倒置多次進行混勻)。
4、 反應(yīng)管中加好所有的試劑后,應(yīng)盡快上PCR儀進行擴增,以免形成過多的二聚體。
5、細胞培養(yǎng)物中含有和等抗不會影響本品的檢測結(jié)果。如果用戶需要進一步提高檢測
使用及效果:將本產(chǎn)品15 μL 與用戶自備的模板,引物和水共15 μL 混合后,直接進行PCR反應(yīng)(PCR 參數(shù)由用戶自己確定),反應(yīng)結(jié)束后直接取10 μL 電泳檢查擴增結(jié)果。
組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
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