減少胱抑素CElisa試劑盒跳孔的幾率的辦法
細節(jié)決定成敗,這對于胱抑素CElisa試劑盒實驗室科研工作者來說也是如此。在ELISA試劑盒實驗中的各項操作細節(jié)有很多,如盡量少用排槍、勤換槍頭,加樣時由低濃度向高濃度加,因為這樣可以減少跳孔的幾率。而整個實驗的關(guān)鍵就是結(jié)果的處理方法了,為您帶來的是ELISA試劑盒檢測結(jié)果分析方法。
①:ELISA實驗中樣品都要做復(fù)孔或三孔,然后計算每個濃度標準品的平均OD值,復(fù)孔的變異系數(shù)應(yīng)該小于20%。
②:平均OD值減去空白孔的OD值。
③:制作標準曲線。
以減去本底后的OD值為X軸,標準品的濃度為Y軸,利用作圖軟件得出一個合適的計算方法。建議使用合適的軟件來作圖,比如CurveExpert 1.4。這款軟件能夠給出很多種方法(比如直線、半對數(shù)、對數(shù)、四參數(shù)方程等)并從中選擇一條zui合適的方程。要想檢驗?zāi)硹l曲線是否與表中數(shù)據(jù)吻合,可以將標準品的濃度作為未知數(shù),將對應(yīng)的OD值帶入該方程,計算出標準品的濃度,得到的結(jié)果應(yīng)該與實際濃度很接近(+/-10%)。選擇擬合度zui高的那條曲線。
如果出現(xiàn)標準曲線的線性不好,或平行性不好(雙孔對照孔的OD值差別很大),或出現(xiàn)跳孔的現(xiàn)象,可能引起的原因有酶標板孔間相互污染、洗板后未能盡快進行下一步操作、添加樣品或其它試劑時操作的方法不對、孵育位置避光性不佳或蓋板膜沒有密封好使得水分蒸發(fā)、酶標板孔問加入的試劑量不同,相對應(yīng)的解決辦法是加樣時請小心勿將液體濺人另一孔中,胱抑素CElisa試劑盒人工洗板時也請小心,勿將洗滌液濺人另一微孔中、在洗板后及時進行下一步操作、添加試劑時請懸空滴入,切記勿將槍頭接觸到板孔內(nèi),吸取不同試劑瓶中的液體時就要更換一次槍頭、確認孵育環(huán)境不透光,蓋板膜將酶標板密封好、使用已校正過的微量加樣器,如將*次加入液體時槍頭上留有一滴的液體滴下,那么將以后槍頭上留有的液體也滴下,以保證加入液體體積的一致性。
鑒別檢查 司可鈉 對照品 171223-200402 100mg
含量測定 對照品 171224-200403 100mg
檢查 2-氨基-2’-氯-5-硝基二苯酮 對照品 1228-9701 100mg
含量測定 對照品 171229-200302 100mg
含量測定 鹽酸愛康寧 對照品 171231-200505 20mg
含量測定 鹽酸甲基愛康寧 對照品 171232-200504 20mg
含量測定 苯甲酰愛康寧 對照品 171233-200405 20mg
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