17羥孕酮Elisa試劑盒應(yīng)用免疫檢測技術(shù)原理
17羥孕酮Elisa試劑盒酶我們現(xiàn)已對能夠呈現(xiàn)在檢測樣品中的許多有機和無機物做了檢測,發(fā)現(xiàn)它們不與這個試劑盒產(chǎn)生交叉反應(yīng)。然而在樣品中也含有一些容易變質(zhì)的化合物,它們通過基質(zhì)影響來攪擾測定,如含脂肪的食物,它們在測定前要經(jīng)過稀釋來消除一些基質(zhì)對實驗結(jié)果的影響。在運用的過程中呈現(xiàn)失誤也會影響成果,例如試劑盒存儲的條件、汲取液體的程序、汲取液體的不、在產(chǎn)生免疫和底物反應(yīng)的過程中培養(yǎng)時間不。
ELISA檢測試劑盒應(yīng)用定性夾心免疫檢測技術(shù)
(1)將特異性抗體與固相載體連接,形成固相抗體:洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)。
(2)加受檢標(biāo)本:使之與固相抗體接觸反應(yīng)一段時問,讓標(biāo)本中的抗原與固相載體上的抗體結(jié)合,形成固相抗原復(fù)合物。洗滌除去其他未結(jié)合的物質(zhì)。
(3)加酶標(biāo)抗體:使固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標(biāo)抗體結(jié)合。*洗滌未結(jié)合的酶標(biāo)抗體。此時固相載體上帶有的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量成正相關(guān)。
(4)加底物:夾心式復(fù)合物中的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。根據(jù)顏色反應(yīng)的程度進行該抗原的定性或定量。
根據(jù)同樣原理,將大分子抗原分別制備固醫(yī)學(xué)教丨育網(wǎng)整理相抗原和酶標(biāo)抗原結(jié)合物,即可用雙抗原夾心法測定標(biāo)本中的抗體。
用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條,這些多肽是中國型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強的肽段,分別來自于該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3。
將樣品或標(biāo)準(zhǔn)品加入孔中并孵育,如果其中存在HEV IgM抗體,這些抗體就會與HEV 的多肽抗原結(jié)合,并固定在上面,洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根過氧化物酶)酶結(jié)合物,經(jīng)第二次孵育后,酶結(jié)合物就會與*次孵育結(jié)合上的HEV IgM抗體相結(jié)
合,洗板除去未結(jié)合的酶結(jié)合物,加入TMB底物溶液。
17羥孕酮Elisa試劑盒酶在第三次孵育時會發(fā)生酶-底物反應(yīng),只有那些含有HEV IgM抗體和酶結(jié)合物所形成的復(fù)合物的孔才會發(fā)生顏色變化,加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應(yīng),并在波長: 450nm處測量O.D.值,按照本HEV IgM抗體elisa試劑盒的測試標(biāo)準(zhǔn), O.D.值大于或等于Cut-Off值的樣品被認(rèn)為是初試陽性。
beta-Eudesmol 20mg beta-桉葉醇 473-15-4
Beta-Hederin 20mg β-ヘデリン 35790-95-5
Betaine 20mg 甜菜堿 107-43-7
Betaine hydrochloride 20mg 鹽酸甜菜堿 590-46-5
Beta-Sitosterol 20mg β-谷甾醇 83-46-5
Betulin 20mg 白樺脂醇; 樺木醇 473-98-3
Betulinaldehyde 20mg 白樺脂醛 13159-28-9
17羥孕酮Elisa試劑盒
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